发菜细胞液体悬浮培养-天津科技大学生物工程学院.PDF

生物工程工艺实验 发菜细胞液体悬浮培养 发菜细胞液体悬浮培养 谭之磊 谭之磊 A B C F D E G 实验目的 实验目的 （1）学习掌握利用光照生物反 （1）学习掌握利用光照生物反 器对发状念珠藻细胞进行液体培养 器对发状念珠藻细胞进行液体培养 的原理和工艺操作。 的原理和工艺操作。 （2）熟练掌握光照生物反应器的 （2）熟练掌握光照生物反应器的 结构和使用方法。 结构和使用方法。 （3）熟练掌握发状念珠藻细胞和 （3）熟练掌握发状念珠藻细胞和 胞外多糖含量测定方法 胞外多糖含量测定方法 实验原理 实验原理 发状念珠蓝细菌（发菜）具有较高的经济和药用价 发状念珠蓝细菌（发菜）具有较高的经济和药用价 值，为实现发状念珠蓝细菌这一生物资源的可持续 值，为实现发状念珠蓝细菌这一生物资源的可持续 利用，有必要采用人工培养技术来生产发状念珠蓝 利用，有必要采用人工培养技术来生产发状念珠蓝 细菌。 细菌。 作为光合自养生物，发状念珠蓝细菌能利用光能把 作为光合自养生物，发状念珠蓝细菌能利用光能把 CO 和H O等无机物合成为有机物同时释放出氧气。发 CO 和H O等无机物合成为有机物同时释放出氧气。发 2 2 2 2 状念珠蓝细菌细胞的生长依赖于光合作用提供能量 状念珠蓝细菌细胞的生长依赖于光合作用提供能量 并合成细胞生长所需的有机物质，因此高强度的光 并合成细胞生长所需的有机物质，因此高强度的光 合作用有利于发状念珠蓝细菌细胞的生长。 合作用有利于发状念珠蓝细菌细胞的生长。 采用光照反应器进行发状念珠蓝细菌液体悬浮培养。 采用光照反应器进行发状念珠蓝细菌液体悬浮培养。 实验装置与流程 实验装置：光照振荡器、20L光照反 实验装置：光照振荡器、20L光照反 器、光辐射计、三角瓶、天平、烘箱 器、光辐射计、三角瓶、天平、烘箱 等。 等。 实验流程： 实验流程： 斜面藻种 液体种子 摇瓶种子 培养 光照反应器培养 实验步骤及方法 实验步骤及方法 （1 ）藻种：发状念珠蓝细菌Nostoc flagelliforme TUST001(天津科技大学菌种保藏中心保藏) （2 ）培养基：BG-11 ：NaNO 1.5g ，K HPO 0.04g ， 3 2 4 MgSO ·7H O 0.075g ， CaCl ·2H2O 0.036g ，柠檬酸 4 2 2 0.006 g ，柠檬酸铁铵0.006 g ，EDTA 0.001 g ，Na CO 2 3 0.02 g ，痕量盐溶液 1mL(H3BO3 2.86 g，MnCl ·4H O 2 2 1.81 g，ZnSO ·7H2O 0.222 g，NaMoO ·2H O 0.39 g ，