取向蚕丝蛋白支架与间充质干细胞的复合培养-南京中医药大学学术.PDF

JournalofPracticalOrthopaedicsVo1．19．No．10．Oct．2013 文章编号：1008—5572(2013)10—0900—04 取向蚕丝蛋白支架与间充质干细胞的复合培养 袁翰 ，梁金 ，郑欣 ，郭向可 ，李东亚 ，邱旭升 ，陈一心 (1．南京中医药大学中西医结合鼓楼临床 医学院，江苏 南京 210008；2．南京大学医学院附属鼓楼医院创伤骨科，江苏 南京 210008；3．南京大学化学化工学院，江苏 南京 210093) 摘要：目的 探讨不同表面结构的蚕丝蛋 白纳米纤维对间充质干细胞生长增殖及分化的影响。方法 运用静电 纺丝技术制备具有不同取向度的蚕丝蛋白纳米纤维支架，检测不同材料结构的力学性质 ，分离并纯化骨髓间充质干 细胞与取向／非取向纳米纤维支架共培养 ，以纯蚕丝蛋白膜作对照。测定其细胞毒性及细胞增殖率；扫描电镜观察细 胞形态、生长、分布及与材料黏附情况。免疫荧光显微镜观察细胞核形态及细胞骨架排列情况。结果 扫描电镜观察 显示采用静电纺丝法制备的取向蚕丝蛋白纳米纤维支架呈交互编织的多孔 网状结构，取向及非取向两种纳米材料生 物相容性好 ，可促进骨髓间充质干细胞的稳定增殖，并沿纤维长轴分布排列。力学测试 中取向蚕丝蛋白纳米纤维材 料展示出较强的力学各向异性。结论 取向蚕丝蛋白纳米纤维具有独特的生物学和力学性质，是一种在骨缺损修复 方面具有潜力的组织支架材料。 关键词 ：骨缺损；组织支架；骨髓问充质干细胞；组织工程 中图分类号：R318．08 文献标识码 ：A TheFabricationofOrientedSilk FibroinNanofibersandApplicationsforBoneTissueRegeneration in．vitro YUAN Han 。LIANGJin2， ZHENG Xin ．etn2 (1．Drum TowerClinicalCollegeof IntegrativeMedicine，NanjingUniversityofTraditional ChineseMedicine，Nanjing 210008，China；2．AffiliatedDurmTowerHospitalofNanjingUniversityMedicalSchool，Nanjing 210008，China) Abstract：0bjecfive ToevaluatethetopographicalcellguidanceoforientedsilkfibroinnanofibersonBMSCprolifera— tionanddifferentiation．M ethods Orientedandrandom—alignedsilkfibroinfibrousscaffoldswasobtainedviaelectrospinwith rotatingcollectors．BMSCswerethenculturedonthesurfaceofthismateria1．IHCandSEM wereusedtoobservethecellmor— phologyandstructuresofthecytoskeleton．WithMTFassay，theinfluenceoftoporgaphyoncellproliferationwasalsoinvestiga— ted．Results Thetensileexperimentsshowedmechanicallyanistrophicfeaturesof theorientedsilkfibroinnanofibers．BMSCs， whichwereculturedfor3daysonorientedfibrousscaffolds，alignedaccordingtothelongaxisofsilkfibroinfibersonthesur— faceandcomparedtonon-alignedscaffolds．ItwasalsoobservedthatBMSCsculturedonorientedscaffoldshadahigherrateof