唾液及唾液斑检验教案.DOC

昆 明 医 科 大 学 教 案 课程名称：法医物证学 授课对象：法医专业五年级本科生 讲授题目 第十四章 唾液斑检验 讲授时数 2学时 讲授人： 聂胜洁 职称：副教授 职务： 本课目的、要求 1.掌握唾液斑检验的目的、意义及程序。 2.了解唾液斑的特点。 3.掌握确证唾液斑的原理和方法。 4.掌握唾液斑ABO血型测定的原理及方法。 5.了解唾液斑中其它遗传标记测定的原理和方法。 本章节重点、难点 重点：1.唾液斑检验的目的、意义及程序； 2.确证唾液斑的原理和方法； 3.唾液斑ABO血型测定的原理及方法 难点：唾液斑ABO血型测定的原理及方法 六、教学方法（请打勾） 传统式、提问式、学导式、病案分析式、直观教学式（幻灯、手术、录像）、自学式、其它： 七、使用教具: 多媒体 八、思考题： 1．唾液及唾液斑有何特点？ 2．唾液斑检验需解决的问题有那些？ 3．唾液的多态性蛋白和酶有那些？ 九、要求参考书目及章节： 1.《法医DNA分析》，郑秀芬著 2.《司法鉴定学》，李利华 主编 十、讲课内容及时数安排 时间：25min 多媒体 幻灯片  时间：15min 多媒体 幻灯片 时间：35min 多媒体 幻灯片 笫一节 概述 概念：唾液斑(Saliva Spot)是唾液干燥后形成的斑痕。 发现：唾液斑是法医物证检验中常见的生物检材之一。现场的烟蒂、手帕、口罩、纸巾、瓜子皮、果核、喝过水的茶杯、尸体皮肤及其他物品上的咬痕等均可遗留有唾液斑。 一、唾液及唾液斑的特点 组成：唾液是唾液腺的分泌物(Saliva is secretion of the salivary glands)，唾液腺包括腮腺、颌下腺、舌下腺以及口腔粘膜的无数小唾液腺等。唾液中水分约占99.4%，其余为固体物。腮腺分泌浆液，其他各腺分泌粘液。唾液中含有大量的有机物质，如粘蛋白及球蛋白、氨基酸、尿素、尿酸、大量的唾液淀粉酶及麦芽糖酶等，还有血型物质。无机物质有钠、钾、氯、钙、铵、磷酸盐、碳酸盐及硫氰酸盐等。 唾液中还有口腔粘膜脱落上皮细胞、大 量细菌及食物残渣等。 理化性质：正常纯净的唾液无色，无味，接近中性，pH6.6～7.1，低渗。正常成年人每日分泌唾液约1.0～1.5升，分泌量及性质受精神因素、刺激的强度和性质影响，与食物种类亦有一定关系。含粘蛋白多时，唾液呈粘液状，含粘蛋白少时则较稀薄。 吸烟者唾液中硫氰酸化合物含量明显增多。 龋齿患者， 唾液中乳酸含量增加。 唾液斑在白色背景上常呈淡黄色，在紫外线下发淡青色荧光(Saliva stain is light yellow on the white background, paler blue fluorescence under the ultraviolet radiation.)。 二、检验的目的与要求 唾液及唾液斑检验的主要目的是个人识别。 唾液中含有的血型物质及口腔粘膜脱落上皮细胞中的DNA，在斑痕中能长期保存，少量唾液斑即可进行个人识别。(As there has the epithelial cells shed from the mouth mucosa, we can do the personal identification.) 唾液斑检验首先要求确定检材是否唾液斑，确证唾液斑后再作个人识别，判定斑痕的个体来源。 由于含唾液斑的检材通常出现在人们日常生活用品或物品上，例如口杯，烟头，果核等，故确证唾液斑后，可直接进行个人识别，不必进行种属鉴定。但在鉴定咬痕的唾液斑时，首先要确定是人咬痕还是动物咬痕。 三、唾液及唾液斑的提取 采取新鲜唾液样本：要求被鉴定人先漱口， 再将纱布或棉拭子放入口中，浸湿后取出，立即置通风干燥处晾干，分别包装，作好有关的记录。也可将自然流出的唾液，置干净容器内，立即放水浴中煮沸10min，灭活唾液中的血型分解酶活性，然后置冰箱保存。 现场发现与提取：唾液斑是常见的法医物证检材，勘验现场时，必须注意寻找、收集唾液斑。烟蒂、瓜子皮、果核、口罩、手帕等检材，注意用镊子夹取。茶杯、易拉罐、酒瓶等应戴手套提取，不可直接用手触摸，以防检材被取材人的汗液污染。因为分泌型汗中含有的 ABH 物质，会影响 ABO 血型测定结果；而皮肤脱落细胞的 DNA 可干扰唾液斑DNA分型结果。现场发现可疑痰迹、尸体皮肤及其他物体上咬痕部位的可疑唾液斑，应用少量生理盐水浸湿的纱布擦取，晾干后备检。 第二节 唾液斑的证明 唾液中含有大量的淀粉酶，要分析检材是否唾液（斑）时，可检查淀粉酶。但人体粪便、几乎所有的植物、发芽种子和真菌中均含淀粉酶，人体其他分泌液如鼻涕、尿、精液等也含少量淀粉酶，因此