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- 2017-12-18 发布于江西
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PCR技术详细步骤-从RNA抽提到电泳鉴定
PCR技术详细步骤-从RNA抽提到电泳鉴定
最近在做PCR,发点相关知识,大家共同学习。
RNA抽提
一,准备工作
1, 实验器具与材料:
(1) 移液枪:1ml、200ul、10ul
(2) 吸头:1ml、200ul、20ul
(3) 吸头台:放置1ml吸头的一个,放置200ul和20ul的吸头一个
(4) EP管1.5ml、100ul
(5) 玻璃研磨器
(6) 容量瓶:1000ml
(7) 盐水瓶:100ml
(8) 15ml塑料管一个(配75%乙醇用)
2, 实验器具的处理与准备
(1) 塑料制品:(包括吸头、EP管等)
将塑料制品逐个浸泡于1‰DEPC水中(必要时小枪头需要用吸管打入DEPC水)37℃过夜,然后送至高压3次,后在80℃烘烤箱中烘干(或置于37℃中8小时左右烘干),试验前将枪头放入吸头台。
(2) 玻璃制品:(主要是玻璃研磨器)
先泡酸过夜,冲洗干净后,在1‰DEPC水中泡8小时左右,37℃烘干,用蒙锡纸包裹送至干烤3次。
(3) 金属制品:(镊子等)
先洗干净,再送干烤3次。(不需要泡DEPC水)
3, 试剂配制和准备:
(1) DEPC水:泡实验器具的DEPC水的配制:1000ml双蒸水中加1mlDEPC,放在1000ml容量瓶中静置4小时后备用。配75%乙醇的DEPC水的配制:100ml盐水瓶内装40ml双蒸水,加40ulDEPC,37℃过夜,送至高压
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