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土源性蠕虫卵的检查方法与识别
濮阳市疾病预防控制中心微生物检验室 许银怀 景背 1、在热带、亚热带地区的广大农村,寄生虫病是“乡村病”和“贫穷病”。 2、肠道寄生虫病的发病率已被认为是衡量一个地区经济文化发展的基本指标。2000年全世界有45个国家的人口平均寿命不到60岁,而发达国家却为79岁。 3、据2003年全球统计,土源性蠕虫感染者多达27.56亿,疟疾病人4亿,血吸虫病人2.07亿,丝虫病人1.2亿。 4、食源性寄生虫病(旋毛虫病、猪囊尾蚴病等)也因人们饮食习惯的改变时有发生,甚至构成突发性公共卫生事件。 5、利什曼病和锥虫病在非洲和中、南美洲流行,每年有数万人丧生“虫口”;血吸虫病在非洲每年吞噬约28万居民的生命。 6、目前在人体发现的寄生虫有340多种,我国现已发现232种,能引起人致病的有229种,常见的有30余种。 概 念 1、土源性蠕虫:在流行病学上,常将生活史中不需要中间宿主,在宿主体内或自然环境中发育至感染期后直接感染人的蠕虫称为土源性蠕虫(土源性线虫)。 2、医学蠕虫:是指寄生在人体并致病的多细胞软体动物,借身体肌肉的伸缩作蠕形运动。其包括3个门,即扁形动物门、线形动物门和棘头动物门。 3、寄生虫:在寄生关系中,寄生于其他动物的体表或体内,以获取营养并给被寄生的生物带来损害的动物。 土源性线虫卵的检查方法 1、改良加藤法 适用于各种粪便内蠕虫卵的检查及计 数。 2、透明胶纸法 适用于检查蛲虫卵和带绦虫卵。 一、改良加藤法 1954年日本加藤氏首先提出,用在甘油透明液中浸泡过的亲水玻璃纸代替盖玻片,最初称加藤厚涂片法。 1972年Katz等设计出带圆孔的卡片纸做定量,又称Kato-kotz厚涂片法或改良加藤厚 涂片法; 1974年margono等用带圆孔的塑料板做定量工具。 改良加藤法 优点:简便、省时、花费小; 可做定性、定量检查; 虫卵检出率高,适合普查; 1976年亚洲寄生虫防治组织第三次会议上正式将此法列入肠道寄生虫病防治效果考核的标准化方法之一。 改良加藤法 1.材料 (1) 透明液配制法:蒸馏水100ml、纯甘油 100ml、3%孔雀绿(或亚甲基蓝)1ml. (2) 亲水性透明玻璃纸 厚40mm,大小为 25×40mm。 (3) 玻璃纸需在透明液中浸泡24h以上。 改良加藤法 (4) 尼龙绢网(100目)或金属丝网(100目), 在实际工作中80目的用的比较多。 (5) 塑料定量板规格为30mm×13mm。 中央椭圆孔为长径8.3mm,宽4mm,容 积为38.7mm3 。定量板规格为长60mm,宽6mm,厚2mm。 改良加藤法 2. 步骤 (1) 将尼龙绢(5cm×5cm)放在粪便上,用刮 片从尼龙绢上方刮取粪便。 (2) 将定量板放在载玻片中部,并将通过尼 龙绢刮出的粪样填入定量板的中央孔中 ,填满刮平为止(容纳粪样41.7mg)。 (3) 小心取下定量板,粪便就留在载玻片上。 改良加藤法 (4) 取一张经透明液浸泡的亲水玻璃纸,抖 掉多余的浸泡液后,盖在粪便上。用另 一块载玻片轻压,使粪便均匀展开至玻 璃边缘。 (5) 待粪便透明15-20分钟后及时镜检。 改良加藤法 注意事项: ①粪膜要均匀铺开,不宜过厚。 ②透明时间要适度。 ③镜检所用显微镜统一使用目、物镜均为10×的镜头。 蛔虫感染度特别高时,可采取计数10个视野,用定视野抽查法推算全片蛔虫卵数。 具体步骤是: (1) 按下图分布固定抽查10个视野;并计算出这10个视野蛔虫卵总数。 (2) 其计算方法: 按一定规律,如自左而右,自上而下,再自右而左,一行接一行,一个视野接一个视野地用推行器移动涂片,数出全片粪膜视野数,则:全片粪膜蛔虫卵总数=抽查的10个视野蛔虫卵数之和×全片粪膜视野÷10。例如:抽查的10个视野蛔虫卵数相加为366,全片粪膜视野是78,则: 全片粪膜蛔虫卵总数=366×78÷10=2855 二、透明胶纸法 材料 将市售透明胶粘性胶带纸(宽约1.3cm或 者1.5cm),剪成与载玻片一般长或稍长 些反折,粘于载玻片上,并在玻璃片的 一端用记号笔编号。 透明胶纸法 步骤 检查时间以清晨便前为适宜。首先用左手分开受检者臀部,使其肛门及附近皮肤皱褶尽量暴露,并用揭开的胶带片粘贴3点及9点处,使虫卵粘贴于胶纸,然后将胶纸复位粘在载波片上、镜检。 土源性线虫卵的识别 1、直接涂片 2、Kat
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