牡蛎糖原的提取_纯化及补体活性研究.docx

牡蛎糖原的提取、纯化及补体活性研究阳１，２，薇１，２，峰１，２，明１，２宋 荪朱 蓓杨 静孙 黎（１．大连工业大学 海洋食品教育部工程研究中心，辽宁大连１１６０３４；２．大连工业大学 农业部农产品加工技术研发贝类专业分中心，辽宁大连１１６０３４）摘要：采用酶解结合醇沉法从新鲜牡蛎中提取制备牡蛎糖原（ｏｙｓｔｅｒｇｌｙｃｏｇｅｎ，ＯＧ），经阴离子交换柱 ＤＥＡＥ－５２、葡聚糖凝胶柱 ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００分离纯化，得到纯度较高的牡蛎糖原组分 ＯＧ１１。 其蛋白质量分数为０．３３％，糖质量分数为９７．７７％。用气相色谱法对 ＯＧ１１进行单糖组成鉴定，结果表明其中只含有葡萄糖。补体实验表明，ＯＧ１１对补体具有较强的抑制活性，在５．０ｍｇ／ｍＬ 时补体抑制率可达到７７．３８％。关键词：牡蛎糖原；提取；纯化；补体活性中图分类号：ＴＳ２５４．１；Ｓ９８５．３５文献标志码：ＡＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｇｌｙｃｏｇｅｎｆｒｏｍｏｙｓｔｅｒｇｌｙｃｏｇｅｎＳｕｎ－ｙａｎｇ１，２， ＺＨＵ Ｂｅｉ－ｗｅｉ１，２， ＹＡＮＧ Ｊｉｎｇ－ｆｅｎｇ１，２， ＳＵＮ Ｌｉ－ｍｉｎｇ１，２ＳＯＮＧ（１．ＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒｏｆＳｅａｆｏｏｄｏｆＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，ＤａｌｉａｎＰｏｌｙｔｅｃｈｎｉｃＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｄａｌｉａｎ１１６０３４，Ｃｈｉｎａ；２．ＳｐｅｃｉａｌＳｕｂ－ｃｅｎｔｅｒｏｆＳｈｅｌｌｆｉｓｈｏｆＮａｔｉｏｎａｌＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＣｅｎｔｅｒｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅＰｒｏｄｕｃｔＰｒｏｃｅｓｓｉｎｇＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，ＤａｌｉａｎＰｏｌｙｔｅｃｈｎｉｃＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｄａｌｉａｎ１１６０３４，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｙｓｔｅｒｇｌｙｃｏｇｅｎ （ＯＧ）ｗａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｂｙｅｎｚｙｍａｔｉｃｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓａｎｄｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎｗｉｔｈａｌｃｏｈｏｌ． ＴｈｅｅｘｔｒａｃｔｅｄＯＧ ｗａｓｐｕｒｉｆｉｅｄｔｏｈｏｍｏｇｅｎｅｉｔｙｂｙａｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｏｆａｎｉｏｎｅｘｃｈａｎｇｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＤＥＡＥ－５２）ａｎｄ ｇｅｌｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ （Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００）ｔｏ ｏｂｔａｉｎ ｈｉｇｈ ｐｕｒｉｔｙ ＯＧ１１，ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ９７．７７％ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅａｎｄ０．３３％ ｐｒｏｔｅｉｎ．Ｔｈｅｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｏｙｓｔｅｒ ｇｌｙｃｏｇｅｎＯＧ１１ｗａｓ ａ ｈｏｍｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｏｎｌｙ ｇｌｕｃｏｓｅ． ＯＧ１１ ｓｈｏｗｅｄ ａｄｏｓｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔａｎｔｉ－ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｖｉｔｒｏ，ｔｈｅｍａｘｉｍａｌｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｒａｔｅｏｆ７７．３８％ ｗｈｉｃｈ ｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄａｔａｆｉｎａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ５．０ ｍｇ／ｍＬ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｏｙｓｔｅｒｇｌｙｃｏｇｅｎ；ｉｓｏｌａｔｉｏｎ；ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｃｔｉｖｉｔｙ引言糖原是一种仅有葡萄糖组成的特殊 多 糖，是动物体内能源物质的贮存形式。由于其独特的分０牡蛎是一种营养价值很高的海珍品［１］。 牡蛎蛋白质中氨基酸组成完善，富含铁、锌、钙、锰、硒 等微量元素［２］。 近年来，牡蛎的生 理 活 性 得 到 广 泛的关注。已有研究报道表明牡蛎酶解液具有较 好的抗氧化活性［３］，牡蛎提取物对小鼠肝 脏 具 有 保护作用［４］，牡蛎糖氨聚糖具有抗肿瘤活性［５］等。 其中关于牡蛎多糖的相关研究较多。证明了牡蛎 多糖在抗凝血、降血脂［６］、提高免疫功能［７］等方面 均具有较好的活性。子结构，使其在生理活性上不同于一般多糖。陈骞 等 研 究 表 明，牡蛎 糖原具有较好的抗疲劳活 性［８］，并且证明其相对分子质量在数百万 到 数 千 万之间［９］。目前关于牡蛎糖原及其活性的研究报 道尚不多见，因此对其生理活性物质的研究具有 重要意义。本文采用酶法结合醇沉制备了牡蛎糖 原，并通过柱层析分离技术得到纯度较高的牡蛎 糖原组分，对牡蛎糖原的体外补体活性进行了研 究。收稿日期：２０１０－１０－２５．基金项目：国家高技术研究发展计划（８６３计划）项目（２０１１ＡＡ１００８０３）；国家农转资金项目（２００９ＧＢ２Ｂ００００６４）；辽宁省重点实验室项目（２００８４０３００３）；大连市科技攻关技术项目（２００９Ｂ１２ＮＣ０１４）．大连工