利用冰核蛋白n-端结构域在大肠杆菌表面展示人存活蛋白.pdfVIP

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2018-01-05 发布于天津
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利用冰核蛋白n-端结构域在大肠杆菌表面展示人存活蛋白.pdf

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利用冰核蛋白n-端结构域在大肠杆菌表面展示人存活蛋白

网络出版地址：/kcms/detail/31.2035.Q1645.032.html 中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2017, 39(12): 1536– 1542 DOI: 10.11844/cj cb.2017.12.0188 利用冰核蛋白N-端结构域在大肠杆菌表面展示人存活蛋白 1 2 1* 罗砚曦蒋依俐阎辉 1 2 ( 浙江省医学科学院药物所, 杭州 310013; 杭州师范大学医学院, 杭州 310013) 摘要存活蛋白(survivin)是高度特异的广谱肿瘤相关抗原, 利用冰核蛋白(ice nucleation protein, INP)表面展示系统研究在大肠杆菌细胞表面展示人存活蛋白的可行性。将人存活蛋白基因片段和报告基因Cherry融合到冰核蛋白N-端, 构建表面展示载体pET-INP-CHY-SUV并转化大肠杆菌BL2 1(DE3) 。重组菌经IPTG诱导后可检测到红荧光, 荧光强度在胰蛋白酶的作用下降低, 完整细胞ELISA 实验及免疫荧光实验可检测和观察到绿荧光, 表明人存活蛋白在重组菌中得到表达, 并且成功展示于细胞表面, 为进一步研制新型的肿瘤DNA疫苗奠定基础。关键词冰核蛋白; 存活蛋白; 表面展示; DNA疫苗 Display of Human Survivin on Surface of Escherichia coli Using N-terminal Domain of Ice Nucleation Protein 1 2 1* Luo Yanxi , Jiang Yili , Yan Hui 1 ( Institute of Material Medical, Zhejiang Academy of Medical Sciences, Hangzhou 310013, China ; 2Medical School, Hangzhou Normal University, Hangzhou 310013, China) Abstract Survivin is a highly specific broad-spectrum tumor-associated antigens, the feasibility of displaying human survivin protein on the surface of Escherichia coli (E. coli) cells was studied using an ice nucleation protein (INP) surface display system. The survivin gene fragment and the Cherry reporter gene were fused