环糊精酶基因在毕赤酵母中的组成型表达.pdfVIP

福建农业学报 （）： ， ：／／ ３２１ ８２ ８６２０１７ ｈｔｔ ｗｗｗ．ｆｎｘｂ．ｃｎ ～ ｐ ｊｙ ： ／ 犉狌犻犪狀犑狅狌狉狀犪犾狅 犃 狉犻犮狌犾狋狌狉犪犾犛犮犻犲狀犮犲狊 ｄｏｉ１０．１９３０３ ．ｉｓｓｎ．１００８０３８４．２０１７．０１．０１７ 犼 犳 犵 ｊ 陈龙军，陈济琛，林新坚，等 环糊精酶基因在毕赤酵母中的组成型表达 ［］ 福建农业学报， ， （）： ． Ｊ． ２０１７ ３２ １ ８２－８６． ， ， ， ［］ ＣＨＥＮＬＪ ＣＨＥＮＪＣ ＬＩＮＸＪ ｅｔａｌ．ＣｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅＥｘｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎＧｌｃｏｓｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｉｎ犘犻犮犺犻犪 犪狊狋狅狉犻狊 Ｊ．犉狌犻犪狀犑狅狌狉狀犪犾 ｐ ｙ ｙ ｙ 狆 犼 ， ， （）： 狅 犃 狉犻犮狌犾狋狌狉犪犾犛犮犻犲狀犮犲狊 ２０１７ ３２ １ ８２－８６． 犳 犵 环糊精酶基因在毕赤酵母中的组成型表达 陈龙军，陈济琛，林新坚，蔡海松 （福建省农业科学院土壤肥料研究所，福建 福州 ３５０００３） 　 摘 要：为实现环糊精酶在毕赤酵母中的高效表达，以优化合成的环糊精酶基 ＣＧＴ２为基础，构建组成型表达 　 质粒 ＧＡＰＺＡＣＧＴ２，运用电转化方法将 目的基因整合进酵母染色体，构建环糊精酶酵母工程菌 Ｘ３３／ ｐ α ，经摇瓶发酵 后， 活力达 · －１；进一步对工程菌进行摇瓶发酵条件优 ＧＡＰＺＡＣＧＴ２ １２０ｈ ＣＧＴ２ ０．２１Ｕ ｍＬ ｐ α 化，确定其最优发酵条件为： 、 、 · －１、每 补加 的甘油， 后其胞外酶活力 ｐＨ６．５ ２８℃ ２００ｒ ｍｉｎ ２４ｈ ２．５％ １２０ｈ 达到 · －１，是优化前的 倍，实现了环糊精酶在毕赤酵母中的组成型表达。 ０．３６Ｕ ｍＬ １．７ 关键词：环糊精酶；毕赤酵母；组成型表达；发酵 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） Ｑ７８６ Ａ １００８－０３８４ ２０１７ ０１－８２－０５ 犆狅狀狊狋犻狋狌狋犻狏犲犈狓狉犲狊狊犻狅狀狅犳犆犮犾狅犱犲狓狋狉犻狀犌犾犮狅狊犾狋狉犪狀狊犳犲狉犪狊犲犻狀犘犻犮犺犻犪 犪狊狋狅狉犻狊 狆 狔 狔 狔 狆