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- 2017-12-19 发布于河北
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牛新孢子虫感染胶体金检测方法的建立
牛新孢子虫感染胶体金检测方法的建立
杨升 刘维建 宫鹏涛 李建华 杨举 李赫 张西臣
吉林大学动物医学学院 天津农学院动物科学与动物医学学院
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摘????要:
目的 建立快速、灵敏、特异的检测新孢子虫感染牛血清抗体的免疫胶体金试纸条。方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒。分别用兔抗SPA和新孢子虫P40蛋白包被硝酸纤维素膜作为质控线和检测线进行反应条件优化, 组装胶体金试纸条。对试纸条的灵敏度、特异性、重复性和保存期进行检测;利用该试纸条检测120份吉林省某养牛场牛血清中的抗新孢子虫抗体。结果 兔抗SPA抗体的最佳包被浓度为0.5mg/ml, 新孢子虫P40蛋白的最佳包被浓度为1mg/ml。该试纸条检测牛新孢子虫抗体的灵敏性可达到1∶320 (血清稀释度) ;且不与牛瑟氏泰勒虫感染血清发生交叉阳性反应。用3个不同批次的试纸条进行试验, 已知阴性血清及阳性血清显色情况一致。该试纸条置4℃条件下可保存60d。用该试纸条检测牛血清120份, 阳性率为17.5%。结论 建立的牛新孢子虫感染胶体金试纸具有检测快速、灵敏、特异性强等优点, 可用于牛新孢子虫感染监测。
关键词:
牛; 新孢子虫; 胶体金技术; P40蛋白;
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