反义寡核苷酸聚甲基丙烯酸酯纳米粒的入胞行为研究.pdfVIP

反义寡核苷酸聚甲基丙烯酸酯纳米粒的入胞行为研究 1 *2 1 2 3 王文喜 梁文权 钱俊青 陈海靓 翟建峰 1.浙江工业大学药学院 浙江 杭州3100142.浙江大学药学院 浙江 杭州 310031 3.浙江万马药业有限公司,浙江 杭州 310011 摘要 目的 研究反义寡核苷酸 ODNs 聚甲基丙烯酸酯纳米粒的入胞行为,考察在胞内的分布 探讨其入胞机制 方法 采用流式细胞仪测定荧光标记的寡核苷酸的入胞量 考察载体的浓度对 ODNss入胞率的影响 分别采用在37和4 条件下培养 考察ODNs的入胞行为是否具有能量依赖 性 以判定ODNs是通过内吞途径还是通过融合途径进入细胞 将其与氯喹共同孵育 考察氯喹对 细胞内荧光强度的影响 以判定ODNs是否位于溶酶体内 结果 使用聚甲基丙烯酸酯载体后 细 胞内的ODNs的量急剧增加 当载体的浓度达20g/mL时 细胞内的荧光总量增加683倍 当细胞 在4 条件下培养时 仅有少量的ODNs进入细胞 而在37条件下培养细胞内的ODNs大大增加 氯喹对细胞内的荧光强度几乎无影响 结论 ODNs 聚甲基