生物制药PPT教学课件-第二章 生物制药工程.ppt

第二章：生物制药工程基础 第一节培养基制备 第二节空气净化除菌 第三节微生物发酵与酶催化基本理论 第四节产物的提取与纯化 第一节 培养基制备 B、糖蜜的处理 1.糖蜜的主要成分 （1）糖，49—50%，因不同的原料和生产方法不同而异，主要是蔗糖 （2）胶体物质，5—10%，来自于原料 （3）灰分，10—12% （4）生物素，1—10mg/Kg(甘蔗)，0.04—0.06 mg/Kg(甜菜) （5）pH值6.2(甘蔗)，7.4（甜菜） 对于发酵工业可以利用得的主要成分是：糖和生物素 §2 影响消毒灭菌的因素 消毒剂的性质、浓度与作用时间 微生物的种类与数量 温度 酸碱度 有机物 第二节 空气净化除菌 在发酵工业中，绝大多数是利用好气性微生物进行纯种培养，空气则是微生物生长和代谢必不可少的条件。但空气中含有各种各样的微生物，这些微生物随着空气进入培养液，在适宜的条件下，它们会迅速大量繁殖，消耗大量的营养物质并产生各种代谢产物；干扰甚至破坏预定发酵的正常进行，使发酵产率下降，甚至彻底失败。因此，无菌空气的制备就成为发酵工程中的一个重要环节。 一、无菌空气的概念：发酵工业应用的“无菌空气”是指通过除菌处理使空气中含菌量降低在一个极低的百分数，从而能控制发酵污染至极小机会。此种空气称为“无菌空气”。 二、空气净化除菌方法：a.热杀菌 b.辐射杀菌 c.静电除菌 d.过滤除菌法（目前最常用的方法） 三、空气过滤除菌机理： 空气溶胶的过滤除菌原理与通常的过滤原理不一样，一方面是由于空气溶胶中气体引力较小，且微粒很小，常见悬浮于空气中的微生物粒子在0．5~2μm之间，深层过滤所用的过滤介质----棉花的纤维直径一般为16~ 20μm，填充系数为8％时，棉花纤维所形成的孔隙为20~50μm；超细玻璃纤维滤板因纤维直径很小，为1~1．5μm，湿法抄制紧密度较大，所形成的网格孔隙为0．5~5μm。微粒随气流通过滤层时，滤层纤维所形成的网格阻碍气流直线前进，使气流无数次改变运动速度和运动方向，绕过纤维前进。这些改变引起微粒对滤层纤维产生惯性冲击、重力沉降、阻拦、布朗扩散、静电吸引等作用而将微粒滞留在纤维表面上。 包括以下作用：（1）惯性捕集作用；（2）拦截捕集作用；（3）扩散捕集作用；（4）重力沉降作用；（5）静电吸附作用 四、空气过滤除菌的流程 空气过滤除菌一般是把吸气口吸入的空气先进行压缩前过滤，然后进入空气压缩机。从空气压缩机出来的空气(一般压力在0.2MPa以上，温度120~160°C)，先冷却至适当温度(20~25°C)除去油和水，再加热至30~35°C，最后通过总空气过滤器和分过滤器(有的不用分过滤器)除菌，从而获得洁净度、压力、温度和流量都符合工艺要求的灭菌空气。一般，空气净化采取如图所示的工艺流程。 JPF多滤芯膜折叠空气过滤器） 第三节 微生物发酵与酶催化基本理论 基因(gene)这个名词是1909年由遗传学家约翰(W.Johamsen)提出来的。基因工程（genetic engineering），也叫基因操作、重组DNA技术。它是一项将生物的某个基因通过基因载体运送到另一种生物的活细胞中，并使之无性繁殖（称之为克隆）和行使正常功能（称之为表达），从而创造生物新品种或新物种的遗传学技术。 一、基因重组由哪些步骤组成 （1）从供体微生物细胞中，通过酶切消化或PCR扩增等方法，分离出带有目的基因的DNA片段； （2）在体外，将重组DNA分子； （3）将重组DNA分子转移到适当的受体细胞，并与之一起增殖； （4）从大量的细胞繁殖群体中，筛选出获得了重组DNA分子的受体细胞克隆； （5）从这些筛选出来的受体细胞克隆中提取已经得到了扩增的目的基因，并作序列分析等鉴定； （6）将目的基因克隆到表达载体上，导入宿主细胞，大量培养重组微生物，使之在新的遗传背景下实现功能表达，产生出人类所需要的目的产物。 基因工程操作过程大致可归纳为以下主要步骤： 1.分离或合成基因（目的基因的制取）。?? 2.通过体外重组将基因插人载体（基因载体 的选取及DNA的体外重组）;??? 3.将重组DNA导人细胞（ DNA重组体导入受体 细胞）;??? 4.扩增克隆的基因（受体细胞的繁殖扩增）;??? 5.筛选重组体克隆烟对克隆的基因进行鉴定或测序（克隆子的筛选和鉴定）;??? 6.控制外源基因的表达（目的基因的表达）;??? 7.得到基因产物或转基因动物、转基因植物. 基因工程的四大要素  一.基因工程工具酶和DNA加工 二.基因克隆载体 三.目的基因 四.受体细胞 二、微生物发酵方法有哪些？ 分批（间歇）法、半连续法、连续法、补料分批发酵法等。 1.分批式（