急性低温胁近及冬眠温度波动对棘胸蛙免疫、抗氧化系统及Hsp70基因表达的影响.pdfVIP

’’’‘‘‘ ationnoitatressforforiD●tsaM aster Theeffectofacutecold stressandhibernation fluctuationon non-·specific defensesand inthe Hsp70 expressiongiantspiny spinosa) Na Candidate：Wang Chen Supervisor：Shao Xie Zhigang Discipline：Ecology of Science CollegeChemistryLife Normal ZhejiangUniversity,Jinhua321004，Zhejiang 急性低温胁迫及冬眠温度波动对棘胸蛙免疫、抗氧化 融及Hsp70基酞达的聃煳嬲 摘要 两栖动物种群数量下降已经受到人们的广泛关注，结合国内外有关气候变化对两栖 类种群影响的相关研究，我们提出两种与全球气温变化有关的蛙类濒危机制假说：(1) 极端低温胁迫机制假说：极端天气的频繁出现是全球气候异常主要表现之一。非季节性 或季节交替期的气温骤降可能会严重干扰蛙类的免疫和抗氧化防御系统，从而增加对病 原微生物的敏感性，最终导致蛙类种群的衰退。(2)暖冬干扰机制假说：暖冬也是全球 气候异常主要表现之一。暖冬可以提高蛙类越冬环境的气温，引起冬眠温度的日间波动， 从而干扰蛙类的正常冬眠。遭遇暖冬的蛙类在冬眠过程中或冬眠后可能会对环境变化表 防御能力下降，最终导致蛙类种群数量下降。 本文选取野生数量已急剧减少、人工养殖工作尚在探索阶段的大型经济蛙类一棘胸 蛙为研究对象，监测了浙江省开化县野生棘胸蛙分布区冬季的环境气温，在实验室条件 下探究了急性冷胁迫与恢复及温度波动对棘胸蛙生存力、免疫功能、抗氧化能力、能量 和Hsp70mRNA表达量的影响。研究结果可为探讨全球气候变化导致两栖类种群衰退的 机制提供理论依据。主要结果如下： (1)对照组动物在实验期间保持在恒定环境温度(22℃)，处理组每天首先在低温(4℃) 以及第7d的12h和24h进行取样，检测非特异性免疫和抗氧化防御相关参数及热休克蛋白 巨噬细胞呼吸爆发强度均受到显著抑制(火0．05)，当转入22℃恢复后两者回升至对初 始和对照水平(尸0．05)；但第7d两者不再受到低温抑制。急性低温也显著抑制了胃溶 在第7d仍能诱导组织MDA含量的增加(尸0．05)，而且肝脏MDA降低的速率比肾脏要快。 同时，急性低温可以诱导肝脏和肾脏超氧化物岐化酶(SOD)活性以及肝脏谷胱甘肽 mRNA的表达，但经多 急性低温胁迫能够加大机体的氧化水平并抑制免疫反应和Hsp70 次胁迫后部分细胞免疫和抗氧化防御机能会产生对抗性的适应变化。 (2)将棘胸蛙首先在相对正常的冬眠温度(4℃)下驯化1个月以保证其在生理上的稳 定，我们认为其己进入冬眠状态。驯化结束后，第l组仍保持在驯化温度，第2组通过 编程设置温度波动：每日低温恒温培养箱温度现在4℃保持5h后逐渐升至12(2(约 数。结果表明：波动组在实验期间共有6只死亡，且均发生在第一周，而恒温组在实验 期间仅死亡1只。非特异性免疫在低温下出现适应性变化，如外周血吞噬活性显著增加， 而胃溶菌酶活性显著