原核生物的DNA聚合酶.PPT

医学生物化学与分子生物学研究所 * 逆转录酶(reverse transcriptase) 逆转录(reverse transcription) 逆转录酶 一、逆转录病毒和逆转录酶 依赖RNA的DNA聚合酶 ( RNA dependent DNA polymerase, RDDP) 医学生物化学与分子生物学研究所 * 逆转录病毒细胞内的逆转录现象 RNA 模板 逆转录酶 DNA-RNA 杂化双链 RNA酶 单链DNA 逆转录酶 双链DNA 医学生物化学与分子生物学研究所 * 逆转录酶 A AA A T T T T AAAA SI核酸酶 DNA聚合酶Ⅰ 碱水解 T T T T 分子生物学研究可应用逆转录酶，作为获取基因工程目的基因的重要方法之一，此法称为cDNA法。 以mRNA为模板，经逆转录合成的与mRNA碱基序列互补的DNA链。 试管内合成cDNA cDNA ?complementary DNA? 医学生物化学与分子生物学研究所 * 二、逆转录研究的意义 逆转录酶和逆转录现象，是分子生物学研究中的重大发现。 逆转录现象说明：至少在某些生物，RNA同样兼有遗传信息传代与表达功能。 对逆转录病毒的研究，拓宽了20世纪初已注意到的病毒致癌理论。 医学生物化学与分子生物学研究所 * 滚环复制(rolling circle replication) 三、滚环复制和D环复制 是某些低等生物的复制形式，如?X174和M13噬菌体等。 3?-OH 5?-P 5? 5? 5? 3? 3? 3? 3? 5 滚环复制 5 ?? 5? 3? 3? 5? 医学生物化学与分子生物学研究所 * 医学生物化学与分子生物学研究所 * dNTP DNA-pol γ D环复制(D-loop replication) 是线粒体DNA (mitochondrial DNA，mtDNA)的复制形式。 医学生物化学与分子生物学研究所 * DNA损伤（突变）与修复 DNA Damage (Mutation) and Repair 第五节 医学生物化学与分子生物学研究所 * 遗传物质的结构改变而引起的遗传信息改变，均可称为突变。 在复制过程中发生的DNA突变称为DNA损伤(DNA damage)。 从分子水平来看，突变就是DNA分子上碱基的改变。 医学生物化学与分子生物学研究所 * 一、突变的意义 （一）突变是进化、分化的分子基础 （二）突变导致基因型改变 （三）突变导致死亡 （四）突变是某些疾病的发病基础 医学生物化学与分子生物学研究所 * 二、引发突变的因素 物理因素 紫外线(ultra violet, UV)、各种辐射 UV 化学因素 医学生物化学与分子生物学研究所 * 医学生物化学与分子生物学研究所 * 三、突变的分子改变类型 错配 (mismatch) 缺失 (deletion) 插入 (insertion) 重排 (rearrangement) 框移 (frame-shift) 医学生物化学与分子生物学研究所 * DNA分子上的碱基错配称点突变(point mutation)。 发生在同型碱基之间，即嘌呤代替另一嘌呤，或嘧啶代替另一嘧啶。 1. 转换 发生在异型碱基之间，即嘌呤变嘧啶或嘧啶变嘌呤。 2. 颠换 （一）错配 医学生物化学与分子生物学研究所 * 镰形红细胞贫血病人Hb (HbS) β亚基 N-val · his · leu · thr · pro · val · glu · · · · · · C 肽链 CAC GTG 基因 正常成人Hb (HbA)β亚基 N-val · his · leu · thr · pro · glu · glu · · · · · · C 肽链 CTC GAG 基因 * 医学生物化学与分子生物学研究所 医学生物化学与分子生物学研究所 * （二）缺失、插入和框移 缺失：一个碱基或一段核苷酸链从DNA大分子上消失。 插入：原来没有的一个碱基或一段核苷酸链插入到DNA大分子中间。 框移突变是指三联体密码的阅读方式改变，造成蛋白质氨基酸排列顺序发生改变。 缺失或插入都可导致框移突变 。 医学生物化学与分子生物学研究所 * 谷 酪 蛋 丝 5’ ……G C A G U A C A U G U C …… 丙 缬 组 缬 正常 5’ ……G A G U A C A U G U C …… 缺失C 缺失引起框移