棘胸蛙MGC IIB基因的克隆、多态性及其与嗜水单胞菌杂的抗病相关性研究.pdfVIP

DissertationforMaster to Molecular andassociation identification，polymorphism Aeromonas infectionof or hydrophila maj IIBforthe class fiog，Paaspinosa complex giantspiny Candidate：Yu Xiaoyun Zheng Supervisor：Pro．Rongquan Discipline：Ecology of Science Chemistry＆Life College Normal 321004，Zhejiang Zhejiang University，Jinhua lllUlllllllllllllllllllllllllllllllt llII Y2194736 棘胸蛙MHC皿基因的克隆、多态性及其与嗜水气单胞茵 感染的抗病相关性研究 摘要 棘胸蛙(PaaspinosaDavid)，又名石蛙，是我国棘蛙属中分布最广的物种之 一，目前主要分布于云南、贵州、安徽、江苏、浙江、江西、湖北、湖南、福建、 广东、广西和香港等地。与其它两栖动物一样，由于栖息地破坏、野生资源过度 利用以及全球气温变暖等造成的病菌蔓延，棘胸蛙的种群数量已经下降了30％ 左右。主要组织相容性复合体(MHC)是广泛存在于脊椎动物体内与免疫功能 密切相关的高度多态基因群，MHCII类抗原与许多动物疾病的抗病性、感病性 密切相关。MHC作为一种内在因子，其变异模式被认为在两栖动物数量的下降 中起了关键作用。棘蛙属是蛙科系统关系研究的重要类群，对研究两栖动物的系 统发育和进化有重要的意义。同时，棘胸蛙是一种具有较高经济价值的物种，研 究与其免疫力有关的MHC基因具有理论和实践的双重意义。 MHC IJB等位基因多态性与 lib类基因进行克隆与多态性分析，并研究了MHC 棘胸蛙抗病力之间的关系，为筛选MHC皿抗病相关基因分子标记，建立基因 分子标记辅助遗传育种工作提供基础。主要结果如下： IIB基 (1)利用同源扩增和RACE．PCR技术获得了棘胸蛙1136bp的MHC 因全长cDNA序列，并对其序列特征和结构进行了分析，包括765bp的开放阅 (3’帆)。通过与NCBI上已经发表的同源物种进行序列对比，确定测的基因 序列是棘胸蛙MHCIIB基因序列，其与非洲爪蟾的相似性达到72％。利用MEGA IIB基因的 4．O软件对棘胸