尼帕病毒和亨得拉病毒核蛋白基因N在杆状病毒表达系统的表达及反应原性鉴定研究.pdfVIP

第六次全国会员代表大会暨第11次学术研讨会 随着淘洗次数的增加．从固相平板洗脱下来的噬菌粒数显示了增加的趋势，在第5轮筛选后结合到包 被AP重组蛋白抗原免疫试管的噬菌体与第一轮相比，富集了30倍。 3．2．4 pDAN．ScFv重组质粒诱导表达结果 M蛋白质分量Marker(分子量从上到下分别为118kD、85 由SDS．PAGE图可知：重组质粒子诱导表达产量较高，用蛋白质电泳、凝胶成像分析系统分析可得其表达 量可达30％。 3．2．6ScFv蛋白的纯化结果 由SDS．PAGE图可知：表达产物经过洗涤纯化，用蛋白质电泳、凝胶成像分析系统分析单链抗体纯度 可达50％。 3．2．7复性单链抗体生物学活性检测(Western．blotting检测) 抗体有与AP目的蛋白结合的生物学活性。 3讨论 3．1本研究建立了用噬菌体抗体库技术筛选变形链球菌重组表面蛋白AP单链抗体方法，筛选得到13 株阳性克隆，并对其中一株进行诱导表达，表达的目的蛋白占大肠杆菌菌体蛋白的30％，并用 究和免疫检测奠定了基础。 行ELISA检测，因为此种表达产物是抗体片段与噬菌体外壳蛋白(PHI)的融合表达产物。所以这种检测 方法检测结果会山现假阳性．但由于国内实验条件所限，目前尚无更好ELISA检测盼方法。另外