养肝抗纤汤对肝纤维化大鼠肝脏Bcl－２、Bax、PCNA表达的影响.docVIP

精品论文 参考文献 养肝抗纤汤对肝纤维化大鼠肝脏Bcl－２、Bax、PCNA表达的影响 周晓辉　赵凌杰 南京军区南京总医院中西医结合科　江苏　南京　２１０００２ 南京军区南京总医院院管课题(２０１０M０３７) 　　【摘要】　目的　研究并探讨养肝抗纤汤对肝纤维化大鼠肝脏Bcl－２、Bax、PCNA 表达的临床影响,并分析其研究价值.方法　将我院实验室选择的健康大鼠６０只作为研究对象,并且随机分为三组,即对照组、肝纤维化模型组、养肝抗纤汤组,每组大鼠２０只.将二甲基亚硝胺药物配置成浓度为０．５％的溶液,按照０．２毫升/１００克的用药剂量给大鼠腹腔内注射,连续注射四周进行造模.两个月后将所有大鼠处死,并且检查各组大鼠肝脏Bcl－２、Bax、PCNA 表达,同时再检查各组大鼠白蛋白、血丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶的水平含量.结果　养肝抗纤汤组大鼠肝脏Bcl－２、Bax、PCNA 的表达水平与其他两组大鼠相比,差异较大,P值小于０．０５,具有统计学意义.结论　养肝抗纤汤对肝纤维化大鼠肝脏Bcl－２、Bax、PCNA 的表达具有一定的抑制作用,并且会影响大鼠肝细胞的凋亡. 【关键词】　养肝抗纤汤;　肝硬化;　大鼠;　临床效果【中图分类号】R４４ 【文献标识码】B 　　【文章编号】１００８－６３１５(２０１５)１２－０１６２－０１　　 　　肝纤维化是一个复杂的过程,并且是由多种原因导致的慢性肝病向肝硬化发展的共同病理过程[１].抗肝纤维化治疗是治疗慢性肝病过程中重要治疗环节之一.现本文将研究养肝抗纤汤对肝纤维化大鼠肝脏Bcl－２、Bax、PCNA 表达的临床影响,如下文: 　　１　资料与方法１．１　基线资料　将我院实验室选择的健康雌性大鼠６０只作为研究对象,并且随机分为三组,即对照组、肝纤维化模型组、养肝抗纤汤组,每组大鼠２０只.对照组大鼠２０ 只,体重在７５ 克至９８ 克之间,平均体重为(８６．６６plusmn;２．５６)克.肝纤维化模型组大鼠２０只,体重在７４克至９７克之间,平均体重为(８５．９６plusmn;２．４９)克.养肝抗纤汤组大鼠２０只,体重在７６克至９９克之间,平均体重为(８６．４９plusmn;２．３９)克.将三组大鼠的一般资料进行对比,差异较小,P值大于０．０５,因_______此三组大鼠能够进行良好的比较、分析. 　　１．２　临床方法 　　１．２．１　一般试剂　兔抗大鼠多克隆抗体Bax,兔抗大鼠多克隆抗体Bcl－２,小鼠抗大鼠单克隆抗体PCNA,均产自武汉博士德公司;SA１０２２－ 兔Ig－G,SA１０２１－小鼠Ig－G,DAB显色试剂盒,均产自武汉博士德公司;广州市俪科贸易有限公司生产Masson 染色试剂盒;武汉博士德公司生产Poly－LLysine;上海海研生物技术中心生产LN 放免试剂盒、HA 放免试剂盒.其中养肝抗纤汤的主要成分为五味子５克,丝瓜络５克,女贞子８克,白芍８克,五味子５克,当归８克,郁金６克,枸杞子６克,鳖甲５克,鸡血藤５克,路路通４ 克等等[２]. 　　１．２．２　一般方法　将二甲基亚硝胺药物配置成浓度为０．５％的溶液,按照０．２ 毫升/１００克的用药剂量给大鼠腹腔内注射,连续注射四周进行造模.同时给对照组、肝纤维化模型组、养肝抗纤汤组大鼠,每周进行自来水、自来水、养肝抗纤汤灌胃,每周灌胃量为１０毫升/千克,连续灌胃四周.两个月后将所有大鼠处死,用浓度为１０％的水合氯醛０．３５ml/kg对大鼠进行麻醉,剖腹大鼠经下腔并进行采血,将大鼠肝组织取出,并用甲醛固定,脱水后用石蜡包埋.检查各组大鼠肝脏Bcl－２、Bax、PCNA 表达,同时再检查各组大鼠白蛋白、血丙氨酸转氨酶、透明质酸、天冬氨酸转氨酶、层粘连蛋白的水平含量[３].１．３　观察指标　将对照组、肝纤维化模型组、养肝抗纤汤组大鼠的白蛋白、血丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶的水平含量进行比较;将对照组、肝纤维化模型组、养肝抗纤汤组大鼠的Bcl－２、Bax、PCNA 表达水平差异进行比较.１．４　统计学处理　实验结束后,将三组大鼠的临床数据准确地录入到SPSS１５．０统计软件包进行测定.计量资料用(Xplusmn;s)表示,用t检验.当p值小于０．０５时,表明差异存在着统计学意义. 　　２　结果 　　２．１ 将三组大鼠的白蛋白、血丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶的水平含量进行比较:如表一所示. 　　 　　 　　３　讨论 　　肝纤维化发生是一个复杂的多因素作用过程,并且是慢性肝病形成肝硬化的一个不可缺少的阶段.它涉及细胞和分子生物学事件,肝星形细胞(HSC)被激活为肌成纤维细胞,大量增殖并分泌大量细胞外基质是其最重要的机制.PCNA 存在于所有迅速增殖的细胞核中,它的出现明显与增殖有关[４].结缔组织生长因子(CTGF)与器官纤维化的发生有明显相关