微丝聚合剂重构大鼠脊髓星形胶质细胞骨架对水通道蛋白4与K^+通道蛋白4.1基因表达的影响.pdfVIP

中国脊柱脊髓杂志2014年第24卷第6期 ChineseJournalof ineand inalCord，2014，Vo1．24，No．6 555 微丝聚合剂重构大鼠脊髓星形胶质细胞骨架对 水通道蛋白4与K+通道蛋 白4．1基因表达的影响 杜文佳 ，党跃修 ，汪玉 良 ，雷栓虎 ，黄 良增 ，汪 静 ，马靖琳 ，安丽萍 (1兰州大学第二医院骨科 ；2甘肃省骨关节病重点实验室 730030甘肃省兰州市) 【摘要】目的：探讨不同浓度微丝聚合剂 (Jasplakinolide，JSK)对大 鼠脊髓星形胶质细胞水通道蛋 白4(aquapor ins一4，AQP4)和 通道蛋 白4．1(potassium ionchannelprotein一4．1，Kir4．1)基因表达的影响。方法：分离培养原 代大 鼠脊髓星形胶质细胞并鉴定，采用浓度为 0．05~gm／l、0．10~g／ml、0．20~g／ml、0．40~gm／l的JSK干预细胞 2h。 噻唑蓝 比色法 (3—4，5-Dimethyhhiazol-2一yl一25一dipheny]tetrazolium brom，M )检测细胞的增殖情况 ，激光共 聚 焦显微镜观察细胞骨架的变化和 Real—timePCR法检测AQP4和Kir4．1mRNA表达的变化。结果：0．05txg／ml、 0．10p,g／ml、0．20~gm／l和 0．40p~g／ml浓度 的JSK在干预细胞 2h时与空白对照组相 比对细胞的增殖无 明显差异 (尸0．05)，各浓度间相 比无统计学意义。激光共聚焦显微镜观察0．05p~g／ml、0．10lxg／ml和 0．20p,g／ml浓度 的JSK 可 以使得微丝空间结构发生重构 ，而 0．40p,g／ml浓度则使细胞微丝发生破坏 。Real—timePCR检测显示 ， 0．05p,g／ml、0．10p,gm／l、0．20p~g／ml和 0．401xgm／l浓度的JSK均能显著降低AQP4和Kir4．1基因的表达 ，并与对照 组相 比有统计学意义 (PO．05)，且 0．05~g／ml、0．10~gm／l、0．20~g／ml和0．40~gm／l浓度 间相 比也有统计学意义 。 结论 ：0．05~g／ml、0．10~g／ml和 0．20x／g／ml浓度 的JSK可使大 鼠脊髓星形胶质细胞微丝发生重构且可 以下调 AQP4和Kir4．1基 因的表达 。 【关键词】星形胶质细胞；微丝；增殖 doi：10．3969~．issn．1004—406X．2014．06．12 中图分类号：R683．2 文献标识码 ：A 文章编号：1004—406X(2014)～06—0555—06 Effects ofgene expression ofaquaporins-4 and K ion channelprotein-4．1aRer cytoskeleton recon- structionbyjasplakinolideinratspinalcordastrocytesD／U Wenjia，DANG Yuexiu，WANG Yuliang，et al／C／hineseJournalofSpineandSpinalCord，2014，24(6)：555-560 【Abstract】Objectives：ToinvestigatethemRNAexpressionofaquaporins一4(AQP4)andpotassium ionchan— nelprotein-4．1(Kir4．1)bydifferentconcentrationofjasplakinolide(JSK)，amicrofilamentpolymerizationagent， in spinalcord astrocytesofrats． M ethods： Theprimaryspinalcord astrocytesfrom new born ratswereex— tractedandcuhured．3-4，5-Dimethyhhiazo1-2-yl-25-diphenyhetrazolium brom(MTI)wasusedtomeasurethe cytotox