禽类PRL基因的cDNA克隆及生物信息学分析.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAnhuiAgri．Sci．2012。40(3)：1315—1317 责任编辑 王春艳 责任校对 卢瑶 禽类PRL基因的cDNA克隆及生物信息学分析 淮亚红 ，孑J、俊丽 ，何迟壶 (1．中山火炬职业技术学院，广东中山528436；2．广西壮族自治区畜牧研究所，广西南宁5300ol；3．广东 春盛生物科技发展有限公司，广东广州 510870) 摘要 [目的j通过对艘 基因(催乳素基因)的克隆及生物信息学分析，研究该基因编码的蛋 白对禽类就巢性的作用。[方法]利用原 鸡P肛 基 因mRNA序列(NM-205466)与蓝孔雀表达序列标签(EST)数据库进行 Blast检索，以及序列拼接和逆转录一聚合酶链式反应 (RT-PCR)，获得了蓝孔雀P地 基因的部分eDNA序列，并对该序列进行了生物信息学分析。[结果]获得的cDNA序列片段长度为927 bp，包括完整的开放阅读框690bp，编码229个氨基酸。系统发育树的构建发现蓝孔雀与原鸡亲缘关系比较近，与鹑次之，与火鸡亲缘关 系最远。[结论]该研究结果为研究PRL蛋白的生物学功能奠定了基础。 关键词 艘 基因；组织表达；生物信息学 中图分类号 Q811．4 文献标识码 A 文章编号 0517—66l1(2012)o3—01315—03 GeneExpressionandBioinformaticsAnalysisofPoultry脱 Gene HUAIYah·ongetai (ZhongshanTorchPolytechnic，Zhongshan，Guangdong528436) Abstract [Objective]TheaimWaStostudyproteinfunction-encodedby眦 gene(Prolactingene)inthepoultrybroodinessbycloningand bioinformaticsanalysis．JMethodfBasedonblastsearcheswiththemRNAsequenceofCallusP肛 andthePavo．expressedsequencetagsda— tabases，aeDNAfragmentof艘 己genewasobtainedbyRT．PCR．Bioinformaticsanalysisonitwasperformed． R『esult]TheobtainedcDNA fragmentwas927bp．included690bpintegratedORFwhichencoded229aminoacids．PhylogenetietreeanalysisshowedthatCaUu~iScloser toPavohtanCoturnixingeneticrelationship，turkeyiSfarthest．[Conclusion]TheresearchhaslaidhtefoundationforthePRLproteinbiologi— calfunction． Keywords 艘 ￡gene：TissueExpression：Bioinformatics 催乳素(Prolaetin，PRL)是由腺垂体及其他组织和细胞 脏、肝脏、肺 、小肠 、心脏、脾脏和脂肪组织 8个组织 ，用于总 所分泌的肽类激素，在所有的脊椎动物中均存在，其作用广 RNA提取。 泛而复杂。在哺乳动物 中，PRL具有诱导细胞增殖 、调节 1．2 主要试剂 Trizol试剂购 自Gibco公司；转化载体 能量代谢和免疫 、产生母性行为 等生物学功能。对啮 pMD19-T、TaKaRaLATaq酶和M—MLV逆转录酶购 自大连宝 齿类、反刍类及灵长类动物的雌性妊娠、泌乳和胎儿的生长 生物公司；DNA片段回收纯化试剂盒和大肠杆菌DI-I5c~感受 发育以及雄性动物的生殖调节等具有重要的作用 。大 态细胞购自北京天根生化科技有限公司。 量研究表明，PRL主要调控哺乳动物的泌乳等繁殖性状 。 1．3 仪器 TakaraTP600型梯度 PCR仪 (日本 Takara)， 在家禽中，PRL对禽类就巢的发生和维持有重要作用。 DNAEnginePCR仪 (美国BioR