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红曲霉原生质体的制备#再生及其遗传转化系统
遗 传 ! !# $ 研究报告
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红曲霉原生质体的制备 再生及其遗传转化系统
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周礼红 李国琴 王正祥 诸葛 健
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江南大学工业微生物研究中心 工业生物技术教育部重点实验室 无锡 !)$#(
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摘 要 原生质体是研究和建立真菌遗传转化系统的重要工具 为了建立原生质体介导的红曲霉遗传转化系统
!
考察了各种细胞壁裂解酶和渗透压稳定剂等对红曲霉原生质体形成和再生的影响 将红曲霉分生孢子在铺有玻
璃纸的平板上 培养 收获的菌丝体最有利于原生质体的形成和释放 红曲霉菌丝体形成和释放原生
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质体最适裂解酶和酶解时间分别为# ( 和 的酶组合$ 作用
6#? 0@/8 :82-: 6)? 7:0040.@: )? @8./0.@: # !6’
5 5
最适渗透压稳定剂是 最适合原生质体再生的培养基为含 蔗糖的 培养基 原生
’ # ) )
)-30 AB CD 6(-30 EB
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质体液涂布单层再生培养基的方法$ $
再生率最高 菌株 和 分别为 和 在 和 存在
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下 以潮霉素 为抗生素选择标记 用质粒 和 共转化菌株 原生质体 每微克 可获得
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