灰树花多糖Sevage法除蛋白工艺的研究.pdfVIP

第40卷，第5期 安 徽 化 工 Vo1．40．No．5 2014年 10月 ANHUICHEMICAL INDUSTRY 0ct．2014 灰树花多糖 Sevage法除蛋白工艺的研究 郭淑臻 ，张霄翔 ，雷红 (1．合肥工业大学医学工程学院，安徽 合肥230009；2．合肥工业大学生物与食品工程学院，安徽 合肥 230009) 摘要：研究了灰树仡多糖Sevage法除蛋白的工艺 ，采用单因素实验确定 Sevage试剂添加量 、氯仿与正丁醇体积比、脱蛋 白次数以及振摇 时间对灰树花多糖除蛋白效果的影响，并在单因素实验基础上采用响应面法确定了灰树花多糖Sevage法除蛋白的1二艺条件：多糖溶液 与Sevag试剂体积比3．073：1，氯仿正丁醇体积比4．016：1，振摇时间25．59min，脱蛋白率为37．95％，多糖含量为78．32％。 关键词：灰树花子实体多糖；Sevage法；脱蛋白_丁艺 doi：10．3969~．issn．1008—553X．2014．05．010 中图分类号：Q513+2 文献标识码：A 文章编号：1008—553X(2014)05—0027—04 灰树花隶属担子菌亚门、无隔担子菌亚纲、非褶菌 灰树花粗多糖适量，加蒸馏水溶解制成供试品溶液，分 目、多孔菌科 、树花菌属 ，又名贝叶多孔菌 、栗子蘑 、佛 别精密移取供试品溶液和蛋白标准液 (0．563g／L)适量 ， 菌、重菇等，日本俗称舞蘑。由于我国较早的权威专著 置于试管中，分别加入考马斯亮蓝溶液5mL，混匀，静置 《中国的真菌》的采用，灰树花便成为比较通用的汉语名 10min，随行试剂空 白，于 595nm波长处测定各管OD值。 称。目前文献报道灰树花的药用活性物质为多糖。灰树 蛋 白浓度(g／L)-[(测定管OD值 一空 白管 OD值)／ 花多糖具有显著的抗肿瘤、抗HIV病毒、改善免疫功能 (标准管OD值一空白管OD值)1X标准管浓度(0．563g／L) 以及抗肝炎等作用 ，并具有抗凝血、降血糖 、降血脂 、降 (2)单因素实验 压作用，对高血压、糖尿病有一定的疗效，且无任何毒副 选择影响Sevage法分离除杂效果的主要因素如氯 作用lI_1】。灰树花多糖的研究对于开发新型医药、保健食 仿与正丁醇体积比、多糖溶液与Sevage试剂体积比、振 品具有重大的意义 。 摇时间和脱蛋白次数作为考查对象，灰树花粗多糖中蛋 1实验部分 白残留量作为考查指标。 1．1试剂和仪器 (3)响应面法优选脱蛋 白工艺 考马斯亮蓝，分析纯；氯仿、正丁醇，化学纯；灰树 设计响应面实验因素为氯仿正丁醇体积比、料液 花，购 自浙江省庆元县。 比、振荡时间3个因素 ，以除蛋 白率和多糖损失率的 722紫外可见分光光度计；旋转蒸发器；电子匣温 综合评价为响应值。采用designexpe~8．5软件进行响 干燥箱。 应面试验设计，优化脱蛋 白的工艺参数 ，确定最佳试验 1．2实验方法 方案。 1．2．1多糖提取 表 1响应面试验因素设计表 灰树花子实体经过干燥 、粉碎 ，70％水浴 、15倍 80％乙醇溶液浸泡脱脂处理，120％高温水提 1．5h1341，抽 滤，得浓缩提取液，85％乙醇4 静置 24h，离心取沉淀 物。沉淀依次经丙酮、石油醚、无水乙醇洗涤、真空干燥 得到灰树花粗多糖 。 2结果与讨论 1．2．2脱蛋 白