B3HM细胞免疫小鼠脾细胞scFv噬菌体展示文库的构建及表达.pdfVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００７，２７（７）：１２～１６ Ｂ３ＨＭ细胞免疫小鼠脾细胞 ｓｃＦｖ噬菌体 展示文库的构建及表达 许　静　张　磊　刁世勇　刘　斌　孟　磊　姜学英　韩忠朝 （中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室　天津　３０００２０） 摘要　目的：利用噬菌体展示技术构建Ｂ３ＨＭ细胞免疫小鼠的脾细胞表达ｓｃＦｖ文库。方法：用人 骨髓细胞系Ｂ３ＨＭ细胞免疫小鼠，取其脾细胞采用ＲＴＰＣＲ方法扩增Ｖ 和Ｖ 基因并克隆入噬 ? Ｈ ｋ 菌体展示表达载体，构建ｓｃＦｖ文库，测定文库的库容量，ＢｓｔＮＩ酶切单克隆分析文库的多样性，对 ６ 文库进行富集检测，鉴定单克隆噬菌体与Ｂ３ＨＭ细胞结合反应。结果