日本沼虾肠道菌群分离鉴定及饵料和温度对优势菌群影响研究.pdfVIP

中国甲壳动物学会编辑 甲壳动物学论文集 第四辑 讲学士慝敏2003年出版 TRANSACTl0NSOFTHE SOCIETYNo．4 CHINESE CRUSTACEAN PP．357～366 日本沼虾肠道菌群分离鉴定 及饵料和温度对优势菌群影响 李彦芹 刘艳丽 鲍 娜 阚振荣 康现江 (河北大学生命科学学院，保定071002) 摘要：本文对日本沼虾肠道菌群进行了分离鉴定。并初步研究饵料和温度对日本沼虾扬遭 好氧及兼性厌氧微生物优势菌群的影响：采用普通肉汤培养基、TCBS培养基手口EMB培养 基等进行培养分离，分离出23抹菌：利用革兰氏染色、鞭毛染色、芽孢形成实验，以及生 理生化反应．主要包括葡萄搪、阿拉伯搪、柠漾酸盐、山梨醇、肌醇发酵实验，苯丙氨酸 脱氯酶实验．赖裁酸睨铰酶实验，硝酸盐还原实验，VP、MR实验，KCN、氧化酶实验， 接触酶实验等方法．进行初步鉴定：它们隶属于葡萄球菌弱(Staphylococcus)、微球菌属 物总量随着温度的升高呈现增多的趋势；优势菌群则随着温度的升高而呈现不同变化：日 本沼虾摄食前．肠道中的细菌数量约为104cfu／尾。优势菌属为邻单胞菌屑、沙门氏菌餐和 弧菌属；摄食人工配合饵料手玎悔童鱼后，细菌数量呈现先增加(达到105～106cfu／尾)后 减少的趋势。摄食后日本沼虾肠道优势菌群均为邻单胞菌属fⅡ假单胞菌滴。 关键词：日本沼虾肠道菌群 饵料温度 肠道菌群的意义早在19世纪末就被微生物学家重视，并进行了许多有意义的探索。 动物畅道中存在着大量正常的微生物群(Normalmicrobioal)，它们在正常条件下对宿主 非但无害而且有益，栖息在动物肠道内，种类繁多，数目庞大，以共生或拮抗关系构成 一个相对稳定的微生态平衡系统。一般认为肠道菌群是宿主正常生长发育不可缺少的， 他们不仅在维生素的合成、氮化物合成与分解、脂肪和碳水化合物的吸收与利用中起着 重要作用，而且在加厚肠粘膜上皮细胞、抵御外来菌的侵入与定植，以及在促进免疫系 统的功能中起着重要作用(康自，1988)。肠道菌群的影响因子是多元的，包括食物、 环境因子等。食物的种类、营养组成等都会影响到水生动物肠道菌群的组成、定植和更 了全年的调查，结果发现，食性不同的鱼类之间的肠道微生物群存在很大差异。另外饵 料中某些营养素对其也有一定的影响，例如高不饱和脂肪酸(PUFA)在食物中的不同 含量能引起动物肠道菌落的变动(Ring等，1998)。 塘养鱼类的肠道菌群中。乳酸菌密度有随着季节变化而变化的特征。当水生动物受 ·359· 引外界对其产生的不利影响时，比如，食物匮乏、环境恶化、机械搬运等，肠道菌群也 会发生变f{二。在水温骤变、水环境恶化、放养密度过大的情况下，水生动物体内的微生 物群落的微生态平衡就会被破坏，由多样性的微群落结构转变为有利于某些菌群生长繁 殖而失去微生态平衡，多种鱼病则可能随时发生。而且这种情况下，肠内气单胞菌和假 单咆菌的一些种类往往会转化为病原菌(江平等，1997)。随着微生物学和微生态学研 究的深入，利用有益活菌来调节虾体内的微生态平衡(杜振字等，2002)，从而影响虾 类自身有益菌以及提供虾所需营养成分，利于虾的生长及繁殖。作为饲料添加剂治疗虾 类疾病，已经成为一种缝康的养殖方式。 国内外关于虾类肠道菌群的研究较少，王祥红等(2000)对中国对虾肠道微生物进 行了研究，而对淡水虾如日本沼虾肠道微生物的研究至今未发现报道。本文以日本沼虾 为对象，较为详细地研究了其肠道好氧及兼性厌氧菌群特征，并初步研究了不同饵料和 温度条件下，畅道内优势菌群特征，以探讨不同饵料和温度对其肠道菌群的影响，为研 究其肠道菌群生态平衡及演替规律，以及为微生态制剂的研究和应用等方面提供 依据、 一、材料与方法 实验甩虾购买于保定市府河市场。选择体质健壮的日本沼虾，饲养于(40cm× 23cm×3