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海栖热袍菌胞外淀粉酶在Ecoli中的高效表达
2005 32 (4) 25
-E coli *
1 1 1, 2* *
王希菊 蒋 宇 邵蔚蓝
( 214036) 1
( 210097) 2
: , 3
-E co li PCR ( Therm otoga m ar itmi a )
DNA -A amyA, pET-20 ( b)
pET-amyA; amyA ,
amyA pET-20 ( b) pET-amyA; PCR
argU , pET-amyA pET-amyA
E co li JM 109 (DE3), pET-amyAEco li L21-CodonP lus
( DE3) -R IL IPTG: Ecoli JM 109 ( DE3) ( pET-
amyA) ( pET-amyA ) ( pET-amyA ) 16580 U / mL67217 U /mL
89045U /mL, E co li L21-CodonP lus ( DE3) -R IL ( pET-amyA)
138677 U /mL Tm ar itmi a - E coli
: , -, argU ,
: Q93 : A : 0253-2654 ( 2005) 04-0025-06
Hgh-level Expression of Extracellular -Amylase of
*
Therm o toga M ar itmi a in E co li
1 1 1, 2* *
WANG X i-Ju JIANG Yu SHAOW e-iLan
(TheK ey L aboratory of IndustrialB iotechnology of M in istry of Ed ucation, S outhern Yang tze Uni ersity,
Wuxi 214036) 1
(Dep artm ent of Lfi e Science, Nanj ing N orm al Uni ersi,t Nanj ing 210097)2
Abstract: The complete gene encoding extracellular-amylasewas amplified from the genomicDNA ofTherm oto-
ga m aritmi a by polymerase chain reactionThe recombinant plasm id pET-amyA was constructed by inserting the
amplified segment into the expression vectorpET-20 ( b) The signal peptideofamyA genebound ofunoptmi al
codon was cut off to form amyA The recombinant plasm id pET-amyA was obtained by inserting theamyA
into thevectorpET-20 (b) The com
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