精选天然产物分离技术.pptVIP

2 特点 a 优点 分离效果比湿法装柱高 可用薄层最佳分离条件直接套用 对有荧光或颜色的物质，可在紫外灯下将已分离的各层带分别切开，避免常规液相层析中因流出液收集不当而造成的层带交叉 适用于制备性分离 设备简单，消耗溶剂少，工时省， 共轭双键；分子内氢键 b 缺点 样品容量比湿法装柱小，因此，消耗填充剂量大 * 3 原理 与薄层层析相同，借颗粒间的孔隙所产生的毛细作用而展层，因此，可套用薄层条件，分离效果亦相同。干填充剂颗粒的深孔内充满空气，溶剂和样品分子很难进入颗粒的深孔，吸附与解吸主要在外部表面进行。克服了样品分子由于进出填充剂深孔所造成的扩散及传质缓慢，因此其柱效比湿装柱高。 a 种类（填充剂） 氧化铝 活性 III~V 吸附层析 硅 胶 活性 II~III 干柱 聚酰胺层析 分配层析 * b 展开剂 多采用混合溶剂 避免溶剂解混产生，影响分离效果 解决办法：搭配极性相差适当的溶剂 如 石油醚－乙醚 氯仿－乙醇 石油醚－乙醇 氯仿－甲醇 苯、苯酚等不透过紫外光的溶剂对紫外光灯检出层带有影响 c 分离条件探索 探索和选择对样品分离度最大的填充剂和展开剂 薄层层析(最佳分离条件) 同批次 * d 样品容量 1 : 100 ~ 1 : 300 样品只能与吸附剂的外部表面接触 4 操作 a 柱的制备(常用50cm) 聚乙烯薄膜柱 玻璃柱 b 加样和展开 加样：溶液加样；拌样加样 展开： c 层带的定位及分割 * 二、减压柱层析 （抽柱 Vacuum Liquid Chromatography) 1 简介 简便、实用、快速的层析方法，其基本原理与吸附层析相同，适用于较大量的制备性分离或提取物的极性分段划分。（粗分） 2 操作 G-4垂熔玻砂漏斗或短粗柱、磨底抽滤瓶、减压泵及分部收集瓶组成。 a 装柱 b 上样 c 洗脱 d 收集 * 3 注意事项 a 真空度 20~70 mmHg b 洗脱剂极性 由小到大梯度递增 c 交叉色带 4 应用实例 二萜生物碱的分离 黄酮类化合物的分离 * 三、短柱柱层析 （抽柱 Vacuum Liquid Chromatography) 短柱柱层析在制备量分离方面有独到之处，在微量成分的富集上有一定实用价值。 1 短柱层析理论 经典色谱理论：柱效随柱径的加大而下降，柱子愈长，分离越好，柱效越高。 近来研究发现，此理论有一定局限性，在实践基础上，提出新的观点：柱径加大后，在适当条件下柱效反而提高。 a 适当条件： 柱径：3 ~ 20 cm 短粗柱 柱长：5 ~ 30 cm * b 原因 (1) Knox 提出“无限直径效应”，