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李斯特菌
李斯特菌
引言
美国疾控中心2011年9月28日说,美国已有18个州72人因食用受李斯特菌污染的甜瓜而染病.美国《侨报》报道 李斯特菌已致全美16人死亡。
李斯特菌在美国每年约引起2500份病例、500人死亡,其中李斯特菌症是导致死亡的主要病因,其致死率甚至高过沙门氏菌及肉毒杆菌。
生物学特性
革兰氏阳性短杆菌,大小约为0.5μmх1.0-2.0μm,直或稍弯,两端钝圆,常呈V字型排列,偶有球状、双球状,兼性厌氧、无芽胞,一般不形成荚膜
李斯特菌的流行特点
代表菌株
威尔斯李斯特菌
L.welshimei
其中,单增李斯特菌是唯一能引起人类疾病的。单核细胞增生李斯特菌是一种人畜共患病的病原菌。
单增李斯特菌
检测方法
硝酸盐还原试验
用TSBYE肉汤培养物接种于硝酸盐肉汤中,35℃培养5天后,加入0.2mL试剂A,再加入0.2mL试剂B,混合,出现紫红色为阳性反应,表明硝酸盐已被还原,如无颜色出现,在试管内再加入少量锌粉,放置1h,如出现紫红色,表明硝酸盐仍存在,未被细菌还原。只有默氏李斯特氏菌还原硝酸盐
左侧为阳性(红色),右侧为阴性对照
检测方法
血清学鉴定
将TSBYE肉汤培养物接种到3mLTSBYE肉汤中,35℃培养24h,接种2支TSAYE琼脂斜面,35℃培养24h。用3mL0.01mol/l磷酸盐缓冲液将斜面菌苔洗下,菌悬液于80℃水浴中加热1h,以2500r/min离心30,弃去2mL上清夜,将剩余液与沉淀混匀制成菌悬液,进行血清学玻片凝集试验。
种别
血清型
单增李斯特氏菌
1/2A、1/2B、1/2C、3A、3B、3C、4A、4AB、4B、4C、4D、4E、“7”
绵羊李斯特氏菌
5
英诺克李斯特氏菌
4AB、6A、6B、Un(未确定)
威尔李斯特氏菌
6A、6B
西尔李斯特氏菌
1/2B、4C、4D、6B、Un(未确定)
检测方法
小鼠毒力试验
将分离的菌株接种到10 mL TSBYE肉汤中,35℃培养24h,将培养物离心、浓缩,用1mL生理盐水制成菌悬液(浓度为1010个菌/mL),取0.1mL腹腔注射体重为16-18g 小鼠,每组5个观察7d内小鼠死亡情况。用已知致病的单增李斯特氏菌和非致病的英诺克李斯特氏菌相同方法进行,做对照试验。
检测方法
协同溶血(CAMP)试验
在羊血琼脂平板上平行接种β-溶血金黄色葡萄球菌(S.aureus)和马红球菌(R.equi),在它们中间垂直划线接种可疑菌,与两线相近但不相交,在30℃培养24h-48h,检查平板中垂直接种点对溶血环的影响。靠近金黄色葡萄球菌接种点的单增李斯特氏菌的溶血增强,西尔李斯特氏菌的溶血也增强,绵羊李斯特氏菌在马红血球附近的溶血增强。
诊断和预防
(1)根据临床表现
感染后大多为暂时带菌。儿童显性感染表现为脑膜炎及败血症,成人感染表现为各种脏器的实质性病变。
此外,本菌尚可引起肝炎、肝脓肿、胆囊炎、脾脓肿、关节炎、骨髓炎、脊髓炎、脑脓肿、眼内炎等。
(2)病原学检查
如:血及其他标本的培养、脑脊液涂片与培养等。
诊断
预防李斯特菌病的9个方法
诊断和预防
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