精选资料一：核酸分离纯化.pptVIP

RNA抽提注意事项 RNA酶非常稳定，抽提时需防止RNA酶污染！ 尽可能无RNA酶环境操作，最好有专门场所 耗材的处理： 电泳槽：0.5 M NaOH处理后DEPC水清洗 试管：氯仿浸泡处理后DEPC水清洗 枪头和eppendorf管：DEPC水浸泡后灭菌处理 实验者本身防护：一次性手套，口罩等 启盖前震荡离心管有助于防止气溶胶形成 正确的操作方式 RNA抽提常见问题分析（一） Q1、过柱抽提时柱子堵塞 裂解或匀浆出来不彻底：较少样品用量或增加裂解液用量，增加匀浆和裂解时间 Q2、得率低 A、裂解或匀浆出来不彻底：较少样品用量或增加裂解液用量，增加匀浆和裂解时间 B、RNA收集不完全：过柱法：RNA未完全洗脱，加入洗脱液后放置几分钟再离心 溶液法：65度加热促进RNA沉淀溶解 C、未除尽细胞培养液：收集细胞时需尽量除去培养液 D、使用RNAstore保存的细胞：未有效离心，加大离心力（3000g）除去RNAlater Q3、DNA污染 匀浆时，样本太多，而抽提液使用量太小 Q4、蛋白、多糖污染 RNA沉淀时，加入部分盐溶液，选择性沉淀RNA RNA抽提常见问题分析（二） Q5、