MHCⅠ类分子-抗原肽单链三聚体的制备及其应用.docVIP

MHCⅠ类分子-抗原肽单链三聚体的制备及其应用 国际肿瘤学杂志2006年12月第33卷第12期JIntOncol,December2006.Vol33,No.12 MHCI类分子一抗原肽单链三聚体的制备 及其应用 刘琴综述潘建平审校 【摘要】主要组织相容性复合物(MHC)I类分子一抗原肽单链三聚体(SCT)由MHCI类分 子的重链,B:微球蛋白及抗原肽分子用接头相连接折叠形成.SCT能有效地维持其共价结构,并 稳定地在细胞表面表达,能更有效地激活抗原特异性的CD8细胞毒性T淋巴细胞,从而能更有效 地清除病原体感染和恶性肿瘤细胞. 【关键词】基因,MHCI类;肿瘤;疫苗,DNA;免疫疗法 【中图分类号】R730.51【文献标识码】A【文章编号】1673—422X(2006)12—0897—03 PreparationofMHCclassI?antigenicpeptldesingle—chaintrimeranditsapplicationinimmuno- therapyforcancersLIUQInstituteofImmunology,ZhejiangUnweni@,Hangzhou310031,China 【Abstract】Majorhistoc0mpat.bilitycomplex(MHC)classImolecules,antigenicpeptidesingle chaintrimer(SCT)consistsofanantingenicpeptide—spacer-B2microglobulin(B2m)一spacer—H chain.Recently,itisdemonstratedthatSCTscanefficientlymaintaintheircovalentstructure,andtheyare unusuallystableatthecellsulface.SCTcanefficientlyinducethegenerationofantigenicpeptide—specific CD8cytotoxicTlymphocyteresponse,thereforetheycanplayimportantrolesintheeradicationofinfec— tion,particularlyinviralinfectionandtumorcells. 【Keywords】Genes,MHCclassI;Neoplasms;Vaccines,DNA;Immunotherapy 抗原肽一主要组织相容性复合物(MHC)I类分 子异三聚体是由MHC1分子的重链,B微球蛋白 (BITI)及抗原肽分子形成的异三聚体结构,该结构的 稳定性对T细胞免疫有十分重要的意义.只有抗原 肽一MHCI类分子异三聚体在细胞表面稳定表达,才 能有效地激活CD8细胞毒性T淋巴细胞(CTL),引 起T细胞免疫.但如果此异三聚体组装失败,而堆 积在内质网内,或受到某些因素的下调作用,就不能 有效地引起T细胞免疫】.j.近年研究表明,用基因 工程的方法可以制备由接头(1inker)相连的抗原肽, Bm以及MHCI类分子链,折叠形成单链三聚体 (single—chaintrimer,SCT).该结构能有效地维持自 身的共价结构,稳定地在细胞表面表达,且能有效激 活抗原特异性的CD8CTL,因此,SCT在抗病毒和抗 肿瘤免疫治疗及其DNA疫苗的研制中具有十分重要 的意义. 1SCT的制备 1.1SCT制备的策略 基金项目:浙江省科技攻关重点项目(2005C23005) 作者单位:310031杭州,浙江大学免疫学研究所 ? 897? ? 综述? 已成功将游离Bm和MHCI类分子的链编 码基因用寡核苷酸linker序列连接起来形成单链融 合分子.游离的BITI在维持p链天然构象,尤其是 与抗原肽结合的稳定性上具有很大的作用.Cannon 等用一条含有45个碱基的linker序列,构建了小 鼠的MHCI基因(H2D)的胞外功能区与BITI的N 端相连接形成的单链融合分子.其linker序列编码 的连接肽富含甘氨酸和丝氨酸,从而不影响功能区的 折叠.体外抗原肽结合实验表明,该融合蛋白大大提 高了抗原肽结合能力.用带有D一B.m的载体质粒 免疫小鼠,其表达产物能更好地与抗原肽结合,并更 有效地引起抗原特异性的CD8CTL应答. 在此研究基础上,有学者同时应用2个linker序 列,分别将编码抗原肽序列,MHCI类分子重链和 B:ITI的cDNA连接成融合基因,使其表达产物折叠形 成带有共价结合抗原肽的SCT结构.Yu等用这 种方法将小鼠的MHCI类基因(H一2K)和编码卵清 蛋白(OVA)抗原肽的DNA序列构建成编码OVA— B.m—KSC