上海市部分手足口病重症病例的病原学特征.docVIP

精品论文 参考文献 上海市部分手足口病重症病例的病原学特征 汪萍 王小光 骆玲飞 刘继倩 张颖华 宋驰萍 杨丽华 （上海市闵行区疾病预防控制中心 201101） 【摘要】目的 了解上海市部分重症手足口病患儿的肠道病毒感染的基因型别分布特征。方法 用荧光PCR技术检测肠道病毒EV71，CoxA16基因，同时收集流行病学资料，用SPSS进行统计分析。结果 319例疑似重症手足口病患儿的病原为EV71病毒和CoxA16病毒，不同年龄患儿的患病比例不同，1岁以下患儿患病率最高；但不同性别患儿的病原分布并无差异。结论 上海地区手足口病疑似重症患儿以肠道病毒EV71型为优势基因型。 【关键词】手足口病 EV71病毒 CoxA16病毒 【中图分类号】R725.1 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）30-0034-02 手足口病是由肠道病毒引起的一种急性传染病[1]，主要通过密切接触或消化道传播，多发生于10岁以下的婴幼儿，以手、足、口腔等部位皮肤粘膜的皮疹、疱疹、溃疡为典型表现，个别患者可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症。引起手足口病（Hand, foot and mouth disease, HFMD）的病原，最常见的是肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16。近年来，手足口病例有逐年增加趋势，为了解上海市疑似重症手足口病患儿的病原学特点，我们收集了上海市儿科医院就医的319例疑似重症患儿的标本，做了实验室检测以及流行病学分析，现报告如下： 1 材料 1.1 标本：采集上海市儿科医院临床初步诊断为重症手足口病的患儿的咽拭子，粪便标本。 1.2 材料：病毒采样液eaglersquo;s液由上海市疾病预防控制中心提供； EV，EV71，CoxA16检测试剂盒购自达安基因，采用SLAN荧光PCR仪检测。 1.3 流行病学资料：性别，年龄，是否重症等资料由现场流调人员收集。 2 方法 2.1 样品采集：集病人的咽拭子立即放入3ml病毒采样液中eaglersquo;s液中，同时采集患儿的新鲜粪便标本5g左右置无菌采样盒内，两者均放入生物安全运转箱中冷藏，2h内送检。 2.2 样品处理：咽拭子：样品在振荡器上混匀后，取100ul样品加入Eppendorf管内，然后加200ulTrizol，100ul氯仿，振荡混匀，静置2min，12000rpm离心2分钟，取上清于另一洁净的Eppendorf内，加入10ulRNA提取液，振荡混匀8000rpm离心1min，去上清，加入400ul溶液C，振荡混匀，8000rpm离心1min，去上清，100℃干燥器上干燥5min，加入30ulDEPCH2O即为提取好的RNA模板。粪便标本用生理盐水稀释后，8000rpm离心1min，取上清100ul加入Eppendorf管内，其余操作同上 2.3 荧光RT-PCR反应体系：每个反应管加15ul反应液，2ul逆转录酶，3ulTaq酶，5ulRNA模板。 2.4 荧光RT-PCR扩增程序：40℃ 25分钟，1个循环；94℃ 3分钟，1个循环；93℃ 15秒 55℃ 45秒，40个循环。结果判断Ct值小于等于35.1，则判断为样品阳性。 2.5 把每例患儿的流行病学信息以及检测结果输入到Epidata数据库，用SPSS11.5进行统计分析。 3 结果 3.1 319例患儿的检测结果见表1 由图1可看出，不同年龄组患病率不同，年龄越小，患病率越高，1岁以下婴儿EV71感染在所有感染者中所占比例最高。而CoxA16则有所不同，CoxA16在2岁组患儿的比例最大，1岁组和3岁组相近。 3.3 不同性别患儿的基因型别分布见表2：由表可知，男性患儿182例，女性患儿119例，男性患儿多于女性患儿（剔除18例性别不详的患儿）。 表2 不同性别患儿的基因型别分布 Pgt;0.05 基因型分布并无性别差异 4 讨论 引起手足口病（Hand, foot and mouth disease, HFMD）的病原，最常见的是肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16；其次为柯萨奇病毒A5、A9、A10；偶尔也可由柯萨奇病毒A4、A7、B2、B5、B13引起。本次研究中手足口的病原主要为EV71病毒，CoxA16病毒次之，除此之外，还有少数其它病毒。手足口病的临床表现大多为轻型，预后良好，但其中有少数感染者，可发生严重的呼吸道感染、无菌性脑膜炎和脑炎