精品第五章第三节——一二沉淀与离心部分.pptVIP

（3）等密度离心 分离密度不同的颗粒，在离心力作用下上浮或下沉。 常用介质：铯盐。如CsCl、Cs2SO4等 操作方法： 混匀样品与介质 离心 分离 * * 4、离心机操作注意事项 必须事先在天平上精密的平衡离心管和其内容物。 依据不同离心液体选择不同离心管，每次检查转头 低于室温离心时，要先将转头预冷 离心过程中不得随意离开 了解转头最高离心转速和使用积累限时。 * 第三节 酶的分离方法 一、沉淀分离 二、离心分离 三、过滤与膜分离 四、层析分离 五、电泳分离 六、萃取分离 * 沉淀分离：通过改变某些条件或添加某种物质，使酶的溶解度降低，而从溶液中沉淀析出，与其它溶质分离的技术过程。 原理：根据不同物质在溶剂中的溶解度不同而达到分离的目的。 不同溶解度的产生是由于溶质分子之间及溶质与溶剂分子之间亲和力的差异而引起的，溶解度的大小与溶质和溶剂的化学性质及结构有关。 一、沉淀分离 * 沉淀分离方法 适用分子 盐析沉淀法 多用于各种蛋白质和酶的分离纯化 等电点沉淀法 用于氨基酸、蛋白质及其他两性物质的沉淀，单独应用较少，常与其它方法结合使用 有机溶剂沉淀法 多用于蛋白质和酶、多糖、核酸以及生物小分子的分离纯化 复合沉淀法 发展较快的新方法 选择性变性沉淀法 多用于除去某些不耐热的和在一定pH值下易变性的杂蛋白 常用的几种沉淀分离方法 * 1、盐析沉淀法 在盐浓度达到某一界限后，酶的