用超滤法从猪血中分离纯化猪血红蛋白.pdfVIP

第 28卷第 2期 生 物 学 杂 志 Vo1．28 No．2 2011年4月 JOURNALOFBIOLOGY Apr，2011 doi：10．3969／j．issn．2095—1736．2011．02，095 用超滤法从猪血 中分离纯化猪血红蛋 白 刘 峰，肖 科 ，王 翔 ，高 玮 ，王 莹，兰 珂 (重庆大学教育部生物流变科学与技术重点实验室 重庆大学生物工程学院，重庆400044) 摘 要：为 了给人工红细胞的研究提供较高纯度和浓度的血红蛋 白，采用超滤膜分离的方法，通过研究分析，在一定 超滤条件 ，从新鲜猪血中分离纯化得到猪血红蛋 白。并应用 SDS—PAGE凝胶 电泳、紫外一可见分光光度计对纯化后 的血红蛋 白进行了鉴定分析。经分析，优化的超滤条件为：操作压力0．05Mpa、料液温度 12oC；在此务件下分离纯化 的猪血红蛋 白，纯度达到了99％以上 ，浓度较纯化前提高了近 20倍 。 关键词 ：超滤，猪血红蛋 白，纯化 中图分类号：Q819 文献标识码 ：B 文章编号 ：2095—1736(2011)02—0095—03 Separation andpurification ofporcinehemoglobin from porcineblood by ultrafiltration LIU Feng，XIAO Ke，WANG Xiang，GAO W ei，W ANG Ying，LAN Ke (KeyLaboratoryofBiorheologicalScienceandTechnology，ministryofEducation， CollegeofBioengineering，ChongqingUniversity，Chongqing400044，China) Abstract：Inordertoobtainahighpurityandconcentrationofporcinehemoglobinfrom thefreshswinebloodtosupporttheartificial redbloodcellresearch，methodwithuhrafihrationseparatingwasapplied．Thepurifiedhemoglobinwasanalyzedbysodium dodecyl sulfatepolyacrylamidegelelectrophoresis(SDS—PAGE)andultra—visablespectrophotometer．Theuhrafihrationconditionwasunderop— eratingpressure0．05Mpaat12 ．Andtheresultsindicatedthatthepurityoftheporcinehemoglobinseparatedbyuhrafiltrationwas higherthan99％ andtheconcentrationofthehemoglobinwas20timeshigherthanthatbeforepurification． Keywords：ultrafihration；porcinehemoglobin；purify 传统的输血存在血液的储藏与运输、血液配型及可能 血红蛋 白 。血红蛋 白的分离方法有很多，如离心、吸附 因输血产生的疾病传染等问题 。加上突发性公共卫生 等。近年来 ，国内也见到了小部分研究人员的成果。李军 事件的发生 ，如地震 、战伤外科、急性失血性休克等 ，血液 等通过离心、微滤和弱阴离子交换层析法 ，得到了高纯度 的需求量与献血量供求矛盾 ，血液代用品随即产生 。血 高活性的猪血红蛋白 ；李涛、张鸿辉等用热敏法从人脐 液代用品(bloodsubstitute)又称红细胞代用品 (redb