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利用GS基因构建茶氨酸生物合成工程菌的研究.pdf
茶叶科学2008，28(4)：242—248
Ten
Journ吐lof science
利用GS基因构建茶氨酸生物合成工程茵的研究
朱文娴1一，黎星辉1，王丽鸳2，房婉萍p，成浩1，24
(1．南京农业大学茶叶科学研究所，江苏南京210095；2．中国农业科学院茶叶研究所，浙江杭州3lO008)
摘要：为了高效合成茶氨酸，本研究通过将荧光假单胞菌Gs基因转接入pET32a质粒中，再将重组质粒转化
mmol，L
cDZf IPTG，28℃诱导表达，
到E BL2l中，构建了一种生物合成茶氨酸的基因工程菌。工程菌株经O．1
cDjf
湿菌体的酶活达到41．79 BL21的126．64倍。工程菌催化L·谷氨酸钠和盐
U，mgprot，大约是出发菌株E
酸乙胺反应生成茶氨酸的产量达到6．2g，L，其催化L．谷氨酰胺和盐酸乙胺反应生成茶氨酸的能力较出发菌株
Ec口，fBL2l有显著提高。
关键词：谷氨酰胺合成酶；茶氨酸；工程菌；构建
中图分类号：S571．1；Q523 文献标识码：A
Strain
ConstructionofjecD尻Recombinant
Engineered
forTheanine withGSGeneEmbedded
Biosynthesis
ZHU Ha01，2+
Wen．xianl一，LI Li．yuan2，FANGWan．pingp，CHENG
Xing-huil，WANG
Rcsearch 2l0095，China；
(1．Tea Institute，N趴jingA鲥cultIlraluniVcrsityNanjing ^
of
2．TeaResearchInstituteChinescAcademyA鲥cultllralsciences，H缸gzhou3lO008，China)
E fortheanine GS
Abstract：An ontheconstmctionof cDnrecombinantstrain
experiment biosynthesis嘶thgene
this inE．cD“BL21was withme
embeddedwas gene l谵ated pET32a
r印orted．hexperimem，GlutamineSynthetase
toE∞ff l柚dthe E
vectorinorderto ttIe卸ine．The wastransfomedBL2 c口盯
produce ligationproduct engineered
strainwasconstnlcted was w“hinduct
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