WSSV感染中国对虾肌肉与鳃膜蛋白变化及差异蛋白的鉴定.pdfVIP

高技术通讯 年 月 第 卷 第 期 2006 11 16 11 WSSV 感染中国对虾肌肉与鳃膜蛋白变化及差异蛋白的鉴定! 刘庆慧! !!! 黄 倢 !! 杨 冰!! 陈 婷!! 王清印!! ! （ 中国海洋大学海洋生物系 青岛266003 ） !! （ 中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛266071 ） 摘 要 采用十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳（ ）、基质辅助激光解吸电 - SDS 离飞行时间质谱分析（MALDI-TOF / MS ）、生物信息学技术，研究了WSSV 感染中国对虾后 鳃膜蛋白和肌肉组织蛋白的变化。结果表明， 感染中国对虾 后，鳃膜蛋白 WSSV 121 27kD 蛋白增强，至 ， 蛋白增强显著。肌肉组织蛋白在感染 后，出现 条明显差异 721 27kD 481 1 分子量为22kD 的蛋白带。通过对该差异蛋白进行MALDI -TOF / MS 的肽质量指纹图谱及 其生物信息分析，鉴定为钙离子结合蛋白，其在对虾抗病毒感染免疫中的功能值得关注。 关键词 中国对虾， 感染， ，钙离子结合蛋白 WSSV MALDI-TOF / MS 线联用分析技术是一种较为理想的利用数据库分析 0 引 言 蛋白质同源性和确定蛋白质种类等结构信息的方 世纪 年代以来，随着养殖业的迅速发展， 法。本文采用 SDS和生物质谱相结合方法， 20 80 虾类的人工养殖获得很大的收益，同时，也受到了前 比较WSSV 感染不同时段中国对虾肌肉组织与鳃细 所未有的病害侵袭，对虾疾病给水产养殖业带来了 胞膜蛋白表达的变化，分析表达量存在明显差异的 巨大损失。对虾白斑综合征病毒（w1ite spot syn- 蛋白质，并采用肽质量指纹谱图（peptide mass figer- ， ）是养殖对虾的主要病原，近年来 ， ）鉴定差异表达的蛋白质，为对虾抗 dromevirus WSSV printing PMF 国内外许多学者一方面研究对虾病的综合防 WSSV 免疫防治、抗病品种选育及功能蛋白的表达 ［，］ 治 1 2 ，另一方面重点研究如何提高对虾的自身免 提供科学依据。 疫力，增强其抗病机能。目前国内外已经开始从分 1 材料与方法 子水平展开对虾自身防御机制的研究，已报道有多 种因子（如各种水解酶类、氧化酶类、溶菌酶、酶激活 1 .1 实验对虾 剂、酶抑制剂、细胞因子、抗菌肽、溶血素、凝集素等） 实验对虾是中国对虾，平均体长为（12 .32 1 ［ ］ 3-5 参与对虾的抗病过程