东方田鼠和小鼠感染日本血吸虫后组织与血清蛋白组分差异比较研究.pdfVIP

中国畜牧兽医 2012年第39卷第7期 生物技术 ·99· 东方田鼠和小鼠感染日本血吸虫后组织与 血清蛋白组分差异比较研究 成钢。王京仁，王兴平，李淑红 (湖南文理学院动物学湖南省高校重点实验室，环洞庭潮生物资源傈育与利用研究中心，湖南常德415000) 摘要：探讨东方田鼠和小鼠感染日本血吸虫前后不同时点组织与血清中蛋白质电泳谱的变化。分别提取东方田鼠感染 日本血吸虫(0、7、12、25d)和小鼠感染日本血吸虫(O、7、12、45d)后的肝脏、脾脏、肺脏蛋白及血清进行聚丙烯酰胺凝胶电泳， 对结果比较分析并进行组织病理形态学观察。结果显示，小鼠感染日本血吸虫第7和12天后肝脏150ku附近蛋白质条带较 东方田鼠表达量明显增高I东方田鼠在感染日本血吸虫后40～50ku附近蛋白质条带较正常东方田鼠表达明显上调；感染第7 天后肺脏40 ku附近蛋白质条带较其他时间点变化明显；小鼠感染日本血吸虫第7、12和45天后血清中lgG类蛋白质表达量 教东方田鼠显著增高。东方田鼠和小鼠在日本血吸虫感染后不同时点问的组织及血清蛋白组分存在差异，东方田鼠肝脏和 血清中150ku附近蛋白条带较其他动物特异，蛋白质表达丰度高，该蛋白可能与东方田鼠抗日本血吸虫相关。 关键词：东方田鼠；日本血吸虫；蛋白组分}血清蛋白 中图分类号：$852．3 文献标识码：A 文章编号：1671—7236(2012)07-0099-03 东方田鼠(Microtusfortis，Mr)是一种栖居于 中国长江流域的啮齿类动物，流行病学调查和人工 感染试验均证明其对日本血吸虫(Schistosoma歹n— ponicum，sj)感染具有天然抗性，且这种抗性能稳定甲醇、甘氨酸等试剂均为国产分析纯。 ， 遗传(朱国正等，1991)。研究结果表明，sj在Mf体 1．1．2试验材料阳性钉螺。购自湖南省血吸虫 内先后经历皮肤期童虫、肺期童虫及肝期童虫的发 病防治所；25～30g雄性昆明鼠(清洁级)；20周龄 育过程。最终在肝脏消亡(李浩等，2000)。肝脏是蛋 (70～80 g)东方田鼠(长江亚种人工封闭繁育第3 白质代谢的重要器官，除IgG外的其他蛋白质主要 代)，由中南大学湘雅医学院动物学部提供。 由肝细胞合成。当Sj移行到宿主肝脏时，对其蛋白 1．2方法 质的代谢和组成的比例会产生极大影响。Mf血清 1．2．1Mf和小鼠感染sj尾蚴在24～28℃条件 在体外具有显著杀伤日本血吸虫童虫的活性，血清 下，采用常规方法逸出尾蚴，分别腹部感染昆明小 蛋白质是一种种类繁多氇l成复杂、功能广泛的混合 鼠(30士2)尾／只；东方田鼠(i00士5)尾／只。 物，在病理和生理情况下，各种血清蛋白的浓度和比 I．2．2不同时间．点组织蛋白及血清制备分别取 例会发生改变(李祥武等，2007；钟兰等，2007)。为 Mf感染sj后(o、7、12、25d)和小鼠感染sj后(o、 观察Mf和小鼠感染sj后其肝脏、脾脏、肺脏及血清 7、12、45d)的肝脏、脾脏、肺脏及血清，组织经液氮 蛋白电泳图谱的变化，分别对感染Sj不同时间点的 碾磨后，按照每20 以上组织及血清进行蛋白电泳检测，为进一步了解 液的比例加入RIPA裂解液，吹打混匀，在使用前数 Mf感染Sj后生物学动态变化规律和探索Mf抗Sj 分钟内加入PMSF，使其终