基因治疗 刘德培.ppt

基因治疗 中国医学科学院基础医学研究所 医学分子生物学国家重点实验室 刘德培 Definitions of Gene Therapy (1) 1984 Anderson WF: Gene therapy,the insertion into an organism of a normal gene which then corrects a genetic defect. 1990 Miller AD: Gene therapy is defined as the transfer of genetic material into the cells of an organism to treat disease. 1991 Karisson S: Gene replacement therapy has been suggested for many single gene disorders using retroviral vectors as vehicles of gene transfer. Definitions of Gene Therapy (2) 1992 Anderson WF:Human gene therapy is a procedure that is being used in an attempting to treat genetic and other disease. A therapeutic technique in which a functioning gene is inserted into the somatic cells of a patient to correct an inborn genetic errors or to provide a new functions to the cell. 基因治疗策略 基因添加 病毒载体 非病毒载体 DNA修复 同源重组 基因定点修复 RNA修复 剪接体修复 反式剪接 基因治疗的难度 1、疾病的预测、预防、诊断与治疗 各有侧重、相辅相承、自身规律与特点 2、疑难病是对诊断、治疗两方面而言 “不治之症”是对治疗而言 3、基因治疗是对有严重危害的“不治之症” 在分子水平上进行治疗 基因治疗的受治疾病种类 1.单基因遗传病：ADA，血友病，单酶缺陷等 2.多基因遗传病：自身免疫，心血管疾病等 3.获得性遗传病：传染病，肝炎，爱滋病等 4.体细胞遗传病： 恶性肿瘤等 基因治疗中的基因转移 Types of Gene Transfer for Human Gene Therapy用于人类基因治疗的基因转移方式 Ex Vivo 回体(间接体内) 用携带目的基因的载体转染（转化，转导）离体的受体细胞，再将受转染的细胞输回患者体内，与自体组织移植类似。 In Vivo 体内(直接体内) 将目的基因直接注射到患者体内 选择基因转移的受体细胞需考虑的因素 1.选择目的基因有所表达的组织细胞，最好是组织特异性细胞； 2.细胞较易从体内取出，有增殖趋势，且生命周期长； 3.离体细胞较易受外源遗传物质转染； 4.细胞经过转染和一定时间的培养后 再输回体内仍能成活 转移基因的两种整合方式 对基因转移系统的关注要点： 转移系统的安全性和有效性 转移基因在受体细胞整合的稳定性 表达的适宜性和持久性 对一种遗传病是否进行体细胞基因治疗需考虑的条件 1.遗传病发病的分子机制与相应基因的分子结构已较清楚； 2.基因已克隆，表达调控机制已较清楚； 3.该基因正常表达的组织可以在体外进行遗传操作，或者 基因能够在其它允许体外操作的组织中表达； 4.有安全、有效、稳定的基因转移载体和包装细胞系统； 5.基因转移的靶细胞有增殖优势并能长期存活； 6.转移基因在受体细胞完整稳定的整合并能适宜表达。 可望较早进行体细胞基因治疗的遗传病 1.血友病：因子IX缺乏；因子VIII缺乏 2.免疫缺陷:腺苷脱胺酶缺乏；嘌呤核苷磷酸酶缺乏 3.鸟氨酸循环障碍：鸟氨酸氮基甲酰转移酶缺乏； 精氨酸代琥珀酸合成