辽宁一例凡纳滨对虾大规模死亡的病原研究.PDFVIP

第31卷第3期 大 连 海 洋 大 学 学 报 Vol.31No.3 20 16 年6 月 JOURNAL OF DALIAN OCEAN UNIVERSITY June2 0 16 DOI:10.16535/ j.cnki.dlhyxb.2016.03.005 文章编号:2095-1388(2016)03-0256-05 辽宁一例凡纳滨对虾大规模死亡的病原研究 1 1 1 1 2 2 1 1 姚洪 , 张吉鹏 , 杨川 , 张利娟 , 朴元植 , 刘月芬 , 叶仕根 , 李华 (1郾 大连海洋大学 农业部北方海水增养殖重点实验室, 辽宁 大连 116023;2郾 盘锦市水产技术推广站, 辽宁盘锦 124010) 摘要:为对辽宁省盘锦地区2014年出现的大规模死亡凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei展开病原研究, 对 死虾进行了白斑综合征病毒 (WSSV)、 桃拉病毒 (TSV)、 传染性皮下及造血组织坏死病病毒 (IHHNV) 和嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila 的分析鉴定, 提取病虾鳃组织 DNA/ RNA 后, 以特异性引物进行 WSSV、 TSV和IHHNV病毒检测, 通过16SrDNA测序及嗜水气单胞菌特异性引物和气溶素基因的双重PCR 对分离菌株QD1进行分类鉴定, 并对病虾的鳃、 胃、 肝胰腺和附肢进行了组织病理切片观察。 结果表明: 患病对虾WSSV和TSV检测呈阳性; 菌株QD1为嗜水气单胞菌, 其人工回归感染试验结果显示, 分离菌株 能使健康凡纳滨对虾致病死亡; 组织病理学观察显示, 病虾鳃及胃组织出现大量WSSV特征性的病变核, 肝胰腺上皮细胞出现严重萎缩, 肝胰腺管腔变大, 部分肝细胞坏死, 肝胰腺管之间结缔组织中血细胞明显 增多。 研究表明, 此次凡纳滨对虾大量死亡为WSSV和TSV两种病毒与嗜水气单胞菌混合感染所致。 关键词:凡纳滨对虾; 白斑综合征病毒; 桃拉病毒; 嗜水气单胞菌; 组织病理 中图分类号: Q954郾4摇 摇 摇 摇 文献标志码: A 摇 摇 凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei 于 1988 年被 扩大, 同时虾病也随之出现。 2014 年7 月下旬, 引进中国以来, 在养殖过程中已取代了中国对虾并 辽宁省盘锦地区养殖的凡纳滨对虾出现大规模死 获得了巨大的经济效益。 然而, 随着养殖规模的扩 亡, 发病面积达 40%, 有些虾塘死亡率达到 大和养殖生态环境的不断恶化, 凡纳滨对虾的病害 80% ~90%。 本研究中对患病对虾的病原进行了分 状况日趋突出, 以桃拉病毒 (TSV) 病、 白斑综合 离、 鉴定和分析, 旨在为中国北方地区凡纳滨对虾 [1] 征病毒 (WSSV) 病 , 以及引起早期死亡综合征 的病害防控提供借鉴。 [2-3] 的弧菌 和引起红腿、 肠炎的嗜水气单胞菌等细 [4] 1摇 材料与方法 菌病最为严重 。 近年来, 中国南、 北方养殖虾 苗排塘率很高, 损失较大; 而全球每年有大约 1郾1摇 材料 40%的热带养殖虾会因不当的病毒病的预防措施损 [5] 失近30亿美元 。 早期养殖凡纳滨对虾大量死亡 试验用患病凡纳滨对虾采自辽宁省盘锦地区7 的原因说法不一, 被称为偷死病、 肝胰腺坏死病、 个海水养殖虾场, 体长为4郾0 ~5郾0 cm; 病虾活体 早期死亡综合征等, 其病原认为是副溶血弧菌的特 充氧运到大连海洋大学病害实验室后, 在无菌条件 异变种。 也有人认为, 其病原是黄头杆