自噬干预对低剪切应力下血管内皮细胞eNOS和-中国动脉硬化杂志.PDFVIP

CN43鄄1262/ R摇 中国动脉硬化杂志2014年第22卷第9期 875 [文章编号]摇 1007鄄3949(2014)22鄄09鄄0875鄄06 ·实验研究 · 自噬干预对低剪切应力下血管内皮细胞 eNOS和 ET鄄1表达的影响 1 1,2 1 1 1 1 李小红 ,郭凤霞 ,杨 沁 ,李荣庆 ,赵战芝 ,危当恒 (1.南华大学心血管病研究所 动脉硬化学湖南省重点实验室,湖南省衡阳市421001; 2.菏泽市第二人民医院,山东省菏泽市274000) [关键词]摇 剪切应力;摇 自噬;摇 血管内皮功能;摇 内皮型一氧化氮合酶;摇 内皮素1 [摘摇 要]摇 目的摇 探讨自噬干预对低剪切应力下血管内皮细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和内皮素1(ET鄄1)表 -/ - 达的影响。 方法摇 ApoE 小鼠高脂饮食喂饲12周,HE染色法观察主动脉病理改变,免疫组织化学法检测自噬标 志物Beclin1、微管相关蛋白轻链3域(LC3域)和p62 的表达。 人脐静脉内皮细胞和新西兰大白兔颈总动脉置于体 2 2 外灌流系统,分别以低剪切应力(5 dyne/ cm )和正常剪切应力(15 dyne/ cm )灌流1 h,Western blot检测Beclin1、 LC3域和p62 的表达;在此基础上,自噬抑制剂3鄄甲基腺嘌呤(3鄄MA)和自噬激动剂雷帕霉素(rapamycin)孵育低剪 切应力处理后的血管内皮细胞和兔颈总动脉30 min,观察自噬干预对低剪切应力诱导的eNOS和ET鄄1表达的影 响。 结果摇 动脉粥样硬化斑块中Beclin1、LC3域和p62 的表达明显增加;与正常剪切应力组相比,低剪切应力组 Beclin1、LC3域及p62 的表达明显增加;雷帕霉素上调低剪切应力下血管内皮细胞以及离体血管eNOS的表达,抑制 ET鄄1的表达;3鄄MA则进一步抑制血管内皮细胞以及离体血管eNOS 的表达,上调ET鄄1的表达。 结论摇 低剪切应 力抑制血管内皮细胞自噬从而抑制eNOS表达、上调ET鄄1表达,增强自噬能改善该过程。 [中图分类号]摇 R363 [文献标识码]摇 A The Effect of Autophagy Intervention on Vascular Endothelial Cells eNOS and ET鄄1 Expression Under Low Shear Stress 1 1,2 1 1 1 1 LI Xiao鄄Hong ,GUO Feng鄄Xia ,YANG Qin ,LI Rong鄄Qing ,ZHAOZhan鄄Zhi ,and WEI Dang鄄Heng (1.The Institute of Cardiovascular Disease Key Laboratoryfor Arteriosclerology of Hunan Province, University of