纤维素酶降解纤维素的机理研讨.pdfVIP

182 城市害虫综合治理进展——全国第七届城市昆虫学术研讨会论文集 纤维素酶降解纤维素的机理研究① 杨天赐1’2 莫建初1 程家安1 (1．浙江大学应用昆虫研究所，杭州310029； 2．浙江省疾病预防控制中心消毒杀虫所，杭州310009) 摘要纤维素是自然界中最为丰富的天然高分子化合物，它的降解至少需要内切p1，4一葡聚糖酶、外 切pl，4一葡聚糖酶和p葡萄糖苷酶共同作用，而白蚁也必须利用纤维素酶来消化食物中的纤维素来满足自身 的营养需要。本文主要阐明纤维素降解机制及其在工农业生产上的应用前景。 关键词 纤维素酶纤维素 生物降解 基因工程 纤维素是自然界中分布最为丰富的天然高分子化合物，也是植物细胞壁的主要成分，对植 物体具有支持和保护作用。纤维素在草本植物中约占10％～25oA，木材中占40％～45％，亚麻 的作用，地球上所有生命赖于生存的重要过程就是依靠真菌、细菌等微生物以及昆虫纤维素酶 来分解纤维素，维持自然界碳的新陈代谢循环[3]。 1纤维素的降解 1．1纤维素结构 纤维素是由许多D一吡喃葡萄糖经p一1，4糖苷键组成的直链多糖，其基本结构单位是纤维 维持自然界能量和营养物质稳恒的储存物质[4’5]。在纤维素大分子的两个末端分别是苷羟基 (或称隐性醛基)和仲醇羟基，前者当葡萄糖环结构形成开链时可转变成醛基而具有还原性，使 整个大分子具有极性并呈现方向性。天然纤维素由排列整齐而规则的结晶区和相对不规则、松 散的无定形区(非结晶区)组成，其结晶度一般在30～80％之间[6j。 1．2纤维素的降解 迄今已发现固态下纤维素存在着5种结晶变体，即天然纤维素(纤维素I)、人造纤维素 Ⅱ、Ⅲ、I＼『和纤维素x‘7|。目前，在纤维素结构研究方面，主要采用同步加速器、中子衍射仪、透 ①国家自然科学基金资助项目。 资 源 昆 虫 183 mareesei CBH—I核心对微晶纤维素结合能力，揭示其结合常数、最大结合能力以纤维素表面 系数等参数特征。 由于纤维素具有水不溶性高结晶构造，外围又被木质素层所包围，纤维素不但不溶于稀 酸、稀碱和有机溶剂，也很难被酶解，其酶解转换率比淀粉低1～2个数量级[10|。主要降解方式 有酸水解、氧化降解、微生物和酶降解、光化学降解、热降解、离子辐射降解以及机械降解七大 类，纤维素完全水解时能够得到99％的葡萄糖啪。其中，现代工业主要采用微生物和酶来降解 纤维素。 2纤维素酶主要作用机制 2．1 主要成分 纤维素酶最早发现于蜗牛的消化液，是一类将纤维素降解成葡萄糖的多组分酶系的总称， Active 根据CAZy(Carbohydrate 糖苷水解酶口引。纤维素酶来源广泛，常见于昆虫、软体动物、原生动物、细菌、真菌等体内[13|。有 关它的具体划分，迄今为止中外学者仍没有形成统一的概念。综合多数学者观点，它主要由以 3．2．1．4，C；]、外切 下三类成分组成，即内切p1，4一葡聚糖酶endo一(1，4)一B—D—glucanase，EC coside glucohydrolase，EC3：2．1．zt3，纤维素的完全降解需要这三类酶的协同作用[14‘20]。 糖苷键，将其分解成葡萄糖、纤维二糖、纤维三糖和其他寡聚体(见图1)。同时，纤维素链末端 链的断裂也增大了纤维二糖和葡萄糖苷酶等酶类与底物结合的表面积。 V内切葡聚糖酶 ◇外切纤维二糖水解酶I 《》外切纤维二糖水解酶Ⅱ oB--NNN苷：N 09a：)。o∥o 图1纤维素水解图谱(Malherbe等，2002) 外切一p一1，4-葡聚糖酶主要包括p—l，4一葡聚糖纤维二糖水解酶(1，4一pD—glucan drolase，或称纤维二糖水解酶，EC 萄糖，纤维二糖水解酶和口一1，4一葡聚糖葡萄糖水解酶分别作用于晶体纤维素和可溶性纤维糊