养颜祛斑颗粒抗皮肤衰老实验研究.docVIP

精品论文 参考文献 养颜祛斑颗粒抗皮肤衰老实验研究 罗华 （上海中医药大学附属曙光医院药剂科 201203） 【摘要】目的 观察养颜祛斑颗粒对皮肤羟脯氨酸含量和脂褐质含量的影响。方法　采用分别灌胃养颜祛斑颗粒大、小剂量，维生素E，生理盐水，连续36天。观察小鼠皮肤羟脯氨酸和脂褐素含量的变化。结果　给药组中大剂量组与空白组相比在脂褐质、胶原蛋白含量方面有显著差异（plt;0.05，plt;0.01）。结论　养颜祛斑颗粒有抗皮肤衰老作用，对已沉积的老化代谢产物有良好的清除作用。 【关键词】养颜祛斑颗粒 羟脯氨酸 脂褐质 【中图分类号】R96 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）27-0199-01 皮肤是机体衰老最为明显的器官之一。随着年龄的增长，皮肤退行性变，皮肤变薄，含水量减少，萎缩，起皱等。养颜祛斑颗粒是纯中药制剂,临床用于治疗黄褐斑、雀斑等色素沉着性疾病疗效确切,大部分患者使用后还有面部皱纹减少、皮肤白润光泽、弹性增加的效果[1]。本实验通过观察养颜祛斑颗粒对皮肤羟脯氨酸含量和脂褐质含量的影响，探讨养颜祛斑颗粒抗皮肤衰老的作用。现报告如下。 1 材料与方法 1.1动物 昆明种小白鼠，体重20～30g，雌雄各半，由兰州生物制品研究所提供。 1.2药物与试剂 药物：养颜祛斑颗粒(由女贞子、当归等组成),由甘肃中医学院中药研究室提供；维生素E(上海东海制药厂,批号070103)；按成人临床用药换算成动物用药剂量，给予养颜祛斑颗粒大剂量(YY大)、养颜祛斑颗粒小剂量(YY小)、VitE组、空白组使用生理盐水(NS)。 1.3仪器 VIS-7220型分光光度计(北京瑞利分析仪器厂)；电热恒温水浴气锅lt;北京市医疗设备厂)；SJC-Ⅱ型紫外灯(霸州市长城医用设备制造厂)；LP-202A电子天平(常热市衡器厂)；64-I型电动离心沉淀器(江苏响水县仪疗器械厂)；匀浆器；微量吸取器；移液管。 1.4实验方法 取小鼠60只，按性别、体重随机分5组，每组12只，雌雄各半，分笼饲养。给药组分别给予养颜祛斑颗粒大剂量组(3.0g/Kg)、小剂量组(1.5g/Kg)，VitE 组(0.059g/Kg)，空白组(给予生理盐水)，少龄组(不给药)。上述各组，每日灌胃一次，连续14天后，除少龄组外，其它各组分别用Na2S脱去小鼠背部及两肩胛之间的毛， 分别用紫外灯光连续照射5天，每天一小时。继续灌胃20天后，各组再次脱毛。除少龄组外，其它各组分别用紫外灯照射一小时。2天后测定等同面积皮肤羟脯氨酸及脂褐质的含量。 羟脯氨酸含量的测定方法：末次给药后，第二天将小鼠颈椎脱臼处死，各取其脱毛部位皮肤边缘剪开切口，自然剥离将皮肤取下，平展于橡胶板上，皮肤松紧处于自然状态，用直径为1.54cm的打孔器取样。将取下之皮肤剪碎，称重，放入试管中，以每50mg样品加水解液l ml，在100℃温度下水解20min，然后调PH值到6.5左右，加蒸馏水10ml混匀。然后取4ml加30mg活性碳混匀，在3500转／min的离心机中离心10min。取lml匕清液按试剂盒所示方法进行测定。 脂褐质含量的测定方法：取小鼠皮肤组织匀浆，按试剂盒所示方法操作，用荧光分光光度法测定，数据用mu;g/g表示。 2 结果 结果表明，给药组中大剂量组与空白组相比在脂褐质、胶原蛋白含量方面有显著差异，说明该药对小鼠有延缓皮肤衰老的作用。相同面积皮肤中羟脯氨酸含量及脂褐质含量的结果见表1、表2、表3。 表1 养颜祛斑颗料对小鼠皮肤羟脯氨酸含量的影响 与少龄组相比，*plt;0.05，**plt;0.01。 3 讨论 皮肤是机体衰老最为明显的器官之一。随着年龄的增长，皮肤退行性变，皮肤变薄，含水量减少，萎缩，起皱等。皮肤变薄除表面细胞层数减少，真皮中胶原纤维含量也减少。胶原纤维主要由胶原蛋白构成，羟脯氨酸是其所含的一种主要的而又相对恒定的氨基酸，它在其它蛋白中含量甚微。机体衰老时，胶原纤维及其它大分子的交连增加，在自由基的作用下，大分子使交联的羟脯氨酸羟化酶活力降低，导致羟脯氨酸含量减少[2]。所以测定皮肤中羟脯氨酸含量的变化可作为受试动物皮肤衰老程度的指标。脂褐质，又称老年色素，过氧化脂质分解产物，丙二醛(M