猪IFNγ基因的克隆与在大肠杆菌的高效表达与复性研究.pdfVIP

第六次全国会员代表大会暨第11次学术研讨会 猪IFN—Y基因的克隆与在大肠杆菌的高效表达与复性研究 贾世玉1陈如明1陈国柱 马凤龙1李朝阳2乔彦良1傅兴伦1赵怀龙1 (I济南军区疾病预防控制中心，济南，250014；2山东信得药业有限责任公司，青岛，266061) 摘要根据Gene 根据大肠杆菌密码子的偏嗜性改造后克隆入原核表达载体pBV220中，鉴定后筛选表达重组菌进行发酵培 养、温度诱导后，收集菌体超声波破碎后提取包涵体并进行初步纯化，利用胱氨酸一二仁胱氨酸再氧化法对 纯化后的包涵体变性液进行分段稀释法复性研究。以细胞病变抑制法(MDBK-VSV为基本检测系统)测 定复性液的抗病毒比活性高达5．8×106U／mg。 关键词：猪IFN-7基因表达包涵体复性 1材料与方法 1．1材料 菌种：大肠杆菌JMl09和宿主表达菌DH5a由本实验室保存。 载体：pBV220表达载体，由本实验室保存。pMDl8．T LS RNA 试剂：TRIzol