应用实时定量法与酶联免疫吸附试验法对疱疹病毒检验效果的比较研究.docVIP

精品论文 参考文献 应用实时定量法与酶联免疫吸附试验法对疱疹病毒检验效果的比较研究 朱善军 朱同华 沈昊 陆静芬 马春芳 沈国荣（通讯作者） 　　（江苏省苏州市吴江区第一人民医院检验科 江苏 苏州 215200） 　　【摘要】 目的：研究比较疱疹病毒应用实时定量方法与酶联免疫吸附试验方法的检验效果。方法：择取对象为2013年4月至2015年9月期间本院收治的疱疹病毒感染者，共有45例，分别用实时定量法与酶联免疫吸附试验法检测患者血液、分泌物，比较分析两种方法检测情况。结果：在分泌物检测中，实时定量法检测所获阳性率（88.9%）明显高于酶联免疫吸附试验法（44.4%）；在血液标本上，实时定量法检测所获阳性率（37.7%）明显低于酶联免疫吸附试验法（57.7%），两种方法检测阳性率差异显著，有统计学意义（P＜0.05）。结论：在疱疹病毒分泌物检验中应用实时定量法所获阳性率明显高于酶联免疫试验法，检测准确率高，值得在临床中优先使用，但要注意在血液检测中一般不建议使用实时定量法。 　　【关键词】 疱疹病毒；实时定量法；酶联免疫吸附试验法；比较 　　【中图分类号】R751 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）15-0098-02 　　疱疹病毒属于双股DNA病毒，生长周期较长，其感染的宿主范围较广，能够感染人类与其他脊椎动物[1]。疱疹病毒一般侵犯外胚层来源的组织，比如神经组织、皮肤组与粘膜组织，感染位置与引起的疾病比较复杂，且还存在潜伏感染的风险，对人们的健康易造成严重影响，故及时检测出疱疹病毒也变得尤为重要[2-3]。本次研究笔者就疱疹病毒应用实时定量法与酶联免疫吸附试验法的检验效果进行对比分析。 　　1.材料和方法 　　1.1 研究对象 　　选取2013年4月至2015年9月期间本院收治的疱疹病毒感染者45例，均为女性，年龄在20～58岁之间，平均年龄为39.61plusmn;3.24岁，临床症状表现为女性宫颈炎、疱疹性口腔炎、生殖器疱疹、唇疱疹以及皮肤疱疹等，患者和其家属均于知情同意书下愿意配合本次研究。 　　1.2 材料 　　7600全自动实时荧光定量PCR仪购自美国Appliued BioSystem公司，荧光定量PCR引物和探针均购自美国Appliued BioSystem公司，PCR试剂盒购自宝生物（大连）有限公司，酶联免疫吸附试验试剂盒购自科华（上海）生物有限公司 　　1.3方法 　　1.3.1标本处理 棉拭子取病人患处分泌物，将其放在磷酸盐缓冲液中即刻送检，同时采集病人外周血3mL备用。 取100uL标本液和1000uL磷酸盐，混匀后进行离心5000rpm，离心5min，将上层清液去除，取沉淀物制备模板。 　　1.3.2模板制备 将沉淀物与1000uL磷酸盐充分混匀，然后煮沸并持续20min，离心后进行检测。 　　1.3.3疱疹病毒定量检测 按照PCR试剂盒说明要求进行试验，模板取值10uL，引物浓度设定为50pmoL/L，于7600全自动实时荧光定量PCR仪下检测，反应条件为：91℃ 30S, 56℃ 30S, 71℃ 1min，40个循环。酶联免疫吸附试验法按照试剂盒说明要求常规进行。 　　1.4 观察指标 　　观察和分析两种方法检验阳性情况，并进行比较分析。 　　1.5 统计学处理 　　利用SPSS18.0软件对研究据施予统计学处理和分析，其中计量资料用均数plusmn;标准（x-plusmn;s）差表示,计数资料用%表示，以卡方比较检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。 　　2.结果 　　应用实时定量法和酶联免疫吸附试验法分别对分泌物和血液中的疱疹病毒进行检测，结果对比如表1所示，从表1数据来看，在分泌物检测上，实时定量法阳性率可达88.9%，和酶联免疫吸附试验法相比明显要高；在血液检测上，酶联免疫吸附试验法阳性率可达57.7%，与实时定量法阳性率相比明显要高，两种检验方法在阳性率上差异显著，具有统计学意义（P＜0.05）。可见，在不同检测对象上，两种方式各具优势。 　　表1 血液、分泌物应用实时定量法和酶联免疫吸附试验法检验结果[n(%)] 　　类别 实时定量法阳性率 酶联免疫吸附试验法阳性率 　　分泌物 88.9（40/44） 44.4（20/44）* 　　血液 37.8（17/44） 57.7（26/44）* 　　注：和实时定量法相比较，*表示P＜0.05。（这个就是三线表） 　　3.讨论 　　目前在临床中比较常见的疱疹病毒有单纯疱疹病毒1型、2型、水痘带状疱疹病毒、EB病毒、巨细胞病毒、人类疱疹病毒6型、7型以及8型[4]。疱疹病毒经常会对人体皮