液相色谱实例分析.ppt

液相色谱常见问题 压力异常（偏高、波动） 漏液 保留时间漂移 基线问题（漂移、噪声） 峰形异常 压 力 压力是液相色谱中最重要的指标，要经常关注 压力的变化。 保留时间的变化经常是由于压力问题引起的。 不同溶剂即使在相同流速和温度的情况下压力 也是不同的。 记下仪器正常状态时，在固定条件下（流动相、流速、温度等）的压力显示值。 压力过低 如果压力为零： 泵头中没有液体，充满气泡 单向阀完全堵死 泵的柱塞杆折断 压力传感器损坏(流动相流动正常，但无压力) 如果有压力但是压力比正常时低： 漏液 单向阀堵塞 压力波动 压力在短时间内剧烈波动。 泵头中有气泡 单向阀脏 柱塞密封圈漏液 保留时间不稳定 吸滤头脏 泵输液不正常（压力波动、气泡等） 流动相组分变化 流动相缓冲能力不够 色谱柱平衡时间不够 柱温的变化 柱子问题 噪音大 流动相污染、变质或由低品质溶剂配成 漏液 流动相、泵、检测器流通池内有气泡 流动相各溶剂不相溶或混和不均匀 检测池能量不足 流通池被污染 温度影响（检测器和柱温差别太大） 其他电子设备的影响或电源、地线等 基线漂移 流动相污染，变质或由低品质溶剂配成 流动相不均匀(脱气，使用纯度更高的溶剂) 温度波动 系统平衡时间不够 流通池被污染或有气泡 流通池窗口破裂 峰形问题 死体积太大 柱子被污染或堵塞 色谱柱塌陷 流动相缓冲不足或不合适 样品溶剂选择不当，与流动相之间极性差异太大 样品过载（浓度或体积） 柱温过低 鬼峰 流动相被污染 进样阀残余峰 样品中未知物 色谱柱中的污染物 水 / 甲醇梯度 ODS 柱 鬼峰 鬼峰的出现 流动相 过滤：0.45um或更小孔径滤膜 目的：除去溶剂中的微小颗粒，避免堵塞色 谱柱，尤其是使用无机盐配制的缓冲 液时。 溶剂前处理 峰的变形 根部变宽 有肩或分叉 溶解样品的溶剂选择不当 最好不要选择高溶解性的试剂作为溶解样品的溶剂 甲醇 作为溶剂 20 uL Caffeine 乙醇 作为溶剂 20 uL Caffeine 乙醇 作为溶剂 10 uL Caffeine 最好注入少量样品 检测器基线异常 基线噪音异常大 气泡未脱出 检测器污染 灯老化 出现漂移或不规则波动 系统污染，如色谱柱、管路、检测器和 流动相等等 产生规则波动 室温变化，如空气调节器直吹检测器 泵的脉动 * *