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动物实验 第七届中南地区实验动物科技交流会论文汇编 艾克清胶囊体外抗肿瘤作用 李宗铎，赵君攻，汪保英 (河南中医学院药理毒理学研究室郑州市金水路1号450008) 【摘要】 式计算细胞抑制率，在倒置显微镜下观察二者的细胞形态学改变。结果1．艾克清胶囊能显著抑制A549 细胞及Eca9706细胞的增殖，并且有显著的量效关系。2．在低剂量下，艾克清胶囊对A549细胞的增殖 抑制与对照孔相比有一定的抑制作用，但无统计学意义，对其细胞的形态学有一定的影响；在低剂量 下，Eca9706细胞增殖速度较快；3．高剂量下，艾克清胶囊能显著影响A549细胞的形态，有直接杀死 此二种肿瘤细胞的作用。结论1．艾克清胶囊对A549细胞及Eca9706细胞的增殖有明显的抑制作用。 2．艾克清胶囊对二者的抑制机制可能是通过影响细胞的增殖周期或促进了细胞的死亡。 【关键词】艾克清胶囊；Eca9706细胞；A549细胞 艾克清是临床治疗肺癌的经验方，由连钱草、人参、黄芪、白术、茯苓、莪术等组成，具 有扶正祛邪，散瘀消积的功能，主治肺癌，气虚夹瘀证。为了验证其抗肿瘤作用，我们做了体 外抗肿瘤试验，现将结果报告如下。 1 实验材料 1．1 实验对象 A549细胞、Eca9706细胞购于中国医学科学院细胞中心。 1．2 实验药品 艾克清胶囊内容物5．og，加蒸馏水50ml，置锥形瓶中，密塞超声30min，离心，取上 清液置50ml量筒中，体积为47mi，补加蒸馏水至刻度，转移至lOOM盐水瓶中，滴加4 滴莪术油，摇匀，灭菌45min，配制成0．Ig／ml溶液，备用。 1．3主要试剂 1．3．1细胞培养 胰蛋白酶 华美产品 胎牛血清 Ilyclone产品 青链霉素混合液Hyclone产品 RPMll640培养基 GIBCO产品 1．3．2 MTT实验试剂 MTT Sigma产品 1．4 主要仪器 CO：培养箱 HERA公司 倒置显微镜 Zess公司 ELx800型酶标仪 BIO—TEK公司 生物安全柜 Bake公司 pH测定仪 HANNA公司 493 第七届中南地区实验动物科技交流会论文汇编 动物实验 DL一5型低速大容量离心机 上海安亭科学仪器厂 可调移液器P1000、P200、P100、P20GILSON公司 12通道加样器 GILSON公司 液氮生物容器 成都金风液氮容器有限公司 自动消毒锅 TOMY公司 高压蒸汽灭菌锅 日本HERA产品 2 实验方法 2．1 细胞培养 2．1．1 主要试剂配制 2．1．1．I 培养基的配制 1包RPMll640培养基于粉，加2．Og HCI调pH至6．9，加入10ml抗生素，过滤除菌，分装于血清瓶中待用。 2．1．1．2 D—Hanks液的配制 ． NaCI 89，KCl0。49，Na2HP040．139，KHzP040．069，NaHC030．359，葡萄糖1．Og， 酚红0．029，三蒸水1000ml，搅拌混匀，过滤除菌，分装待用。 2．1．1．3 0．25％胰蛋白酶液 胰蛋白酶0．259，D-Han