DPPC单层膜中分子间相互作用机理初探.pdfVIP

第 31卷 第6期 电 子 显 微 学 报 、，o1．31．NO．6 2012年 12月 JournalofChineseElectronMicroscopySociety 2012—12 文章编号：1000-6281(2012)06—0529—05 GM1／DPPC单层膜中分子间相互作用机理初探 郝长春 ，孙润广 ，张 静 ，何光晓 ，杨 静 (陕西师范大学 1．物理学与信息技术学院生物物理与生物医学工程实验室； 2．食品工程与营养科学学院，陕西 西安 710062) 摘 要 ：单唾液酸四己糖神经节苷脂 (GM1)是生物膜重要 的组分之一，在神经系统病变治疗中起到重要 的作用。 本文通过分析 GM1／．~-棕榈酰基磷脂酰胆碱 (DPPC)混合脂单层膜等温线数据研究了脂膜分子 问的相互作用机 理，并利用原子力显微镜 (AFM)对其形态进行 了观测。实验结果表 明：DPPC在混合脂 中的比例含量 X。 =0．2 时，GM1与 DPPC分子间的相互作用力为吸 引力 ，膜较稳定 ；其它 比例混合 时分子 间的相互作用力为排斥力，且在 X。PPc=0．6时，分子 间相互排斥力最大，单层膜 出现 了明显的富舍 DPPC的微 区和 GM1网状共存 的结构。AFM形 态观测与理论分析结果相一致 。该研 究为 了解 GM1在不同的膜脂系统 中形态和功能的变化提供 了重要 的实验依 据和理论 支持 。 关键词 ：单唾液酸四己糖神经节苷脂 ；单层膜 ；热力学分析 ；原子力显微镜 ；相互作用 中图分类号 ：O621；Q73；Q336 文献标识码 ：A 细胞膜包含丰富的磷脂和糖脂 ，在神经细胞膜 尺度的表面成像技术 ，可以较精细地对脂膜进行相 中神经节苷脂 (Gangliosides)大约 占总脂的6％ ¨， 变行为观测 。本文利用 LB技术制备了表面压力 在脑部 细胞膜 中单 唾液酸 四 己糖 神经节 苷脂 为30mN／m的GM1／DPPC单层膜 ，并利用 AFM对 (GM1)占总脂 的 13％ ，它在细胞的生长、分化 、 其进行观测。 损伤修复及分子识别过程 中起到重要 的作用 。 1 实验部分 在细胞膜中神经节苷脂可用来与磷脂发生相互作用 形成 “筏”状微区结构 。“筏”微区含有大量的信号 1．1 材料与试剂 分子 ，可参与信号转导、蛋 白质分选 、离子通道的调 单唾液酸 四己糖神经节苷脂 (GM1)、二棕榈酰 节 、膜的粘连 、细胞 的生长、分化 、衰老 、凋亡 以及应 基磷脂酰胆碱 (DPPC)均购于 Sigma化学试剂公 急反应 。它们结构和功能状态 的改变 ，会引发多种 司，氯仿 、酒精等其它化学试剂均为分析纯 ；水为离 疾病 ，如肿瘤 、糖尿病 、神经退行性疾病 (如老年痴 子交换3次蒸馏水。 呆症 ，帕金森 氏症 ，阿尔兹罕默氏病等)等 。因 1．2 混合脂单层膜 的表面压力 一平均分子面积 此 ，对 “筏”状微区结构和功能的研究不仅对于揭 (霄-A)曲线 示生物膜微 区结构的形成机制具有重要 的意义，而 分别将不 同比例的 GM1和 DPPC混合脂溶解 且对于理解信号传导途径等生物过程从而指导临床 在氯仿／甲醇 (3：1，V／V)中形成浓度为 1mg／ml的 实践具有重要的意义 。 溶液 。LB膜用KSV-Minitrough(芬兰 KSV公司，槽 对 “筏 ”状微 区结构的研究常使用体外模拟方 子：323mmx75mm)进行制备。用微量进样器将 法研究脂与脂、脂与蛋 白间的相互作用 。尽管关于 溶液均匀地滴加到纯水表面，让其 自动迅速铺展， GM1与 DPPC分子相互作用的机理文献 已有报道 ， 静置 15min，待液面上有机