鸡痘弱毒细胞疫苗生产工艺的革新(1).pdfVIP

坚垦童塑簦匿堂盒生物制品学分会第九次学术研讨会 ·477· 3。：疫苗篓甲!脱毒不彻底，与脱毒剂有关，也与猪的个体差异或品系有关。所以对该疫苗的安全性检验 还应选择更敏感的动物来测定。 参考文献 [I]陆承平主编兽医微生物学(第3版)中国农业出版社，北京．2001． [2]陆承平．姚火春．猪链球菌病与猪链球菌科学进步与学科发展下册，东南大学出版社，1999，339343 [3]何孔旺，陆承平，猪链球菌2型的致端正特性与毒力因子．中国兽医科技，2000，30(9)：17--19 鸡痘弱毒细胞疫苗生产工艺的革新 王忠山，刘长辉，刘 现，张宏波 (辽宁省益康生物制品厂，辽阳111000) [摘要]本研究利用鸡胚成纤维细胞进行鸡痘疫苗的抗原制备，在病毒收获时，将全部病变细胞和培养 液收获，并用于疫苗冻干。实验表明按此全收法收获的鸡痘抗原液与对照组部分收获法收获的抗原液在中间 效力检验上无显著差异；在成品效力检验上也无明显区别。说明采用全收法来提高鸡瘟疫苗产量降低生产成 本是一种创新意义的手段。 [关键词]鸡痘弱毒；细胞疫苗；工艺革新 鸡痘是由鸡痘病毒引起的鸡的一种急性、热性、高度接触传染性的疾病。皮肤型以皮肤(尤其以头部皮肤 为明显)的痘疹、结痂脱落为特征；粘膜型可引起口腔和咽喉粘膜的纤维素性坏死性炎症，常形成假膜，故又 称为白喉病[1]。本病从前世纪在世界各地就有发生，给养殖业带来重大损失。目前没有特效药可以用于治 疗，只有依靠疫苗进行预防接种。而该病疫苗的传统生产在上存在产量低、成本高、劳动强度大等诸多问题。 现将工艺改为维持液和病变细胞全部参与配苗冻干、减少冻融次数，从而提高该苗的产量和质量，取得了良 好效果。现将研究结果报告如下。 1材料和方法 1．1 材料 SPF胚由我厂生物制品制造中心孵化室孵化；鸡痘鹌鹑化弱毒种毒由我厂种毒中心提供；乳汉液、水解 乳蛋白溶液、10倍浓缩199培养液由辽宁省益康生物制品厂配药室提供；实验动物由辽宁省益康生物制品 厂SPF动物中心提供；犊牛血清由大连旅顺血清厂提供。 1．2 方法 度1．5×106／ml以上的细胞悬液备用。 ml细胞悬液。 1．2．2接毒同步接毒0．5～1．Og鸡胚组织毒／1500 接毒细胞。 1．2．4收获 】．2．4．1实验组无菌检验后将转瓶直接放人一20℃冻存备用。 1．2．4．2对照组无菌检验后将培养液弃掉2／3再放人一20C冻存备用。 1．2．5混苗将无菌检验合格实验组和对照组分别混合在一起，抽样并做无菌检验。 1．2．6 中间效力检验按农业部《兽用生物制品规程))(2000年版)提供的方法进行。 ·478· of9th of ProceedingsSymposiumBiologicals Branch,CAAV——S 1·2·7成品效力检验按农业部《兽用生物制品规程》(2000年版)提供的方法交由我厂质检部进行。 2结果与讨论 2．1 对照组与实验组收获抗原中间效力检验结果 如表1和图1所示。由表l所列出的效价检测结果和对比折线图(图1)分析结果可以看Ill实验组和对 照组在中间检测效价上差异并不显著，并且都符合农业部《兽用生物制品规程》(2000年版)所要求的鸡痘疫 苗抗原效价要求，这说明对照组弃掉的那部分细胞维持液中的病毒含量不仅相当可观，而且完全可以作为疫 苗抗原用于疫苗的冻干和生产。 2．2对照组与买验组成品效力检验结果 如表2和【到2所示。从表2和对比折线图(图2)分析结果中不难看出实验组和对照组在成品效价上并 没有明显的区别，而收获时实验组与对照组的抗原收获量差异相当悬殊：对照组每个转瓶有500～700ml的 抗原液参与冻干；而实验组每个转瓶有1500ral左右的抗原液参与冻干。 表l中间效力检验结果 批号 组别 稀释倍数 感染程度