鸡痘弱毒细胞疫苗生产工艺的革新.pdfVIP

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会 6．8鸡发生球虫病时食欲减退，但饮欲增强，治疗时最好选用水溶性抗球虫药，通过 饮水途径给药。 鸡痘弱毒细胞疫苗生产工艺的革新 王忠山， 刘长辉 (金宁保是生物药品有限心司 内蒙古呼和浩特们0030) 摘要本研究利用鸡_眭成歼堆细胞进行鸡痘疲苗的抗原制备，在病毒收获时．将全部痛变细胞和培养液 收获。井用于疫苗冻干．实验袁明按此全收法收获的鸡症抗原液与对照组部分收获法收获的抗原泣在中问 效力检验上无显著差异；在成品效力检验上也无明显区别．说明采用奎收法来提高鸡痘疫苗产量降低生产 成本是一种创新意义的手段． 关键词鸡痘弱毒．细胞疫苗，工艺革新 鸡痘是由鸡痘病毒引起的鸡的一种急性、热性、高度接触传染性的疾病。皮肤型咀皮肤 (尤其以头部皮肤为明显)的痘疹、结痂脱落为特征：粘膜型可引起口腔和咽喉粘膜的纤维 索性坏死性炎症，常形成假膜，故又称为白喉病…．本病从前世纪在世界各地就有发生。 给养殖业带来重大损失。日前没有特效药可叹用于治疗，只有依靠疫苗进行预防接种。而该 病疫苗的传统生产在上存在产量低、成本高、劳动强度大等诸多问题。现将工艺改为维持液 和病变细胞全部参与配苗冻干、减少冻融次数．从而提高该苗的产量和质量，取得了良好效 果。现将研究结果报告如下。 1材料和方法 1．1材料 SPF胚由我厂生物制品制造中心孵化室孵化：鸡痘鹌鹑化弱毒种毒由我厂种毒中心提 供；乳汉液、水解乳蛋白溶液、10倍浓缩199培养液由内蒙古生物药品厂配药室提供；实 验动物由北京梅里亚s一动物中心提供；犊牛血清由大连旅顺血清厂提供。 1．2方法 1．2．1鸡胚成纤维细胞(cEF)的制作：应用常规鸡胚成纤维细胞制备方法制各鸡胚成 纤维细胞01。制成浓度1．5x106，ml以上的细胞悬液备用。 mI细胞悬液。 1．2．2接毒：同步接毒0．5～1．og鸡胚组织毒／1500 1．2．3观察：接毒24h后进行观察，待细胞出现75％以上(大约接毒后96h左右)的细 胞病变(cPE)时收获接毒细胞。 1．2．4收获： 1．2．4．1实验组：无菌检验后将转瓶直接放入-20℃冻存备用． 1．24．2对照组：无菌检验后将培养液弃掉2／3再放入．20℃冻存备用。 1．2．5混苗：将无菌检验合格实验组和对照组分别混合在一起，抽样并做无菌检验。 1．2．6中间效力检验：按农业部‘兽用生物制品规程》(2000年版)提供的方法进行。 1．2。7成品效力检验：按农业部‘兽用生物制品规程》(2000年版)提供的方法交由我厂 质检部进行． 2结果与讨论 2．I对照组与实验组收获抗原中问效力检验结果 如表l和图l所示。由表1所列出的效价检测结果和对比折线图(图1)分析结果可以 看出实验组和对照组在中间检测效价上差异并不显著，并且都符合农业部‘兽用生物制品规 程》(2000年版)所要求的鸡痘疫苗抗原效价要求，这说明对照组弃掉的那部分细胞维持液 中的病毒含量不仅相当可观，而且完全可以作为疫苗抗原用于疫苗的冻干和生产。 381 禽类传疑病 2．2对照组与实验组成品效力检验结果 如表2和图2所示．轶表2和对比折线图(图2)分析结果中不难看出实验组和对照组 在成品效价上并没有明显的区别。而收获时实验组与对照组的抗原收获量差异相当悬殊：对 油杂与癣千． 圈2成品检验对比折线图 塞!：±塑塾查丝墼丝墨 批号 组别 稀释 感染程度 EID∞ 收获量 ‘ 倍数 (m0转瓶)