三个不同亚型HIV-1调节辅助基因DNA疫苗的构建和免疫原性研究.pdfVIP

‘157· 生堡丝生物堂塑免瘥堂盘盛；Q!!生!旦筮!!鲞笙!魍￡婪!』丛i!!出生!!婴!趔：坠b型虹垫!!：!堕：≥!：堕!：2 ．疫苗学． 三个不同亚型HIV．1调节／辅助基因 DNA疫苗的构建和免疫原性研究 解晓燕 万延民 李斌 史继静 仇超 刘朝奇 徐建青 张焕相 目的构建表达中国主要流行亚犁HIV一1 【摘要】 tat—rev—integrase(c—I|l口tf)一vif-nef(TRIVN)融 合基因的DNA疫苗，并比较其免疫原性。方法按人源密码子使用频率对HIV—lCN54(B’／c重组 DNA疫苗。通过Westernblot测定上述DNA疫苗与H1V一1AF_2f株来源的tat一唧一iraegrase(c一地卿一口萨 ，万融合基因DNA疫苗的体外表达效率；利用小鼠模璎比较3个DNA疫苗单独免疫与混合免疫的免 blot 疫原性特征。结果限制性酶切及DNA测序结果表明两个融合基冈重组质粒构建正确；Western 检测结果显示：3个DNA疫苗的体外表达效率摹本相当。小鼠免疫后ELISPOT检测结果显示：在总 4-155．0 4-44．0)SFCs／IOo脾细胞]，CN54- (5130．0 SFCs／106脾细胞)，再者为RIA2-TRIVN[(195．1 TRIVN最弱[(89．5±17．0)SFCs／106脾细胞]。T细胞反应分布情况硅示：3个DNA疫苗单独免疫 时，T细胞反应主要集中在Integrase和Vif蛋白上；而混合免疫可以部分改善针对Nef蛋白的免疫识 别。结论3个亚璎TRIVNDNA疫苗中以AE2f-TRIVN的免疫原性最强；DNA疫苗混合免疫倾向于 促进特异性T细胞反应在TRIVN融合抗原上的均匀分布。 【关键词】 艾滋病病毒；疫苗；T细胞；调节／辅助蛋白；亚优势表位 ofDNAvaccines derivedfromthreedifferent regulatory／accessory Immunngenicity encoding proteins in XIE Zhao— strainsChina prevalent Xiao—yan‘．WANFan—min‘．uBin．SHIJi-jing．QIUChao，uU Cell SoochowUniversi- qi，XU Huan—xiang．‘Departmentof Biology，MedicalCollegeof Jian—qing，ZHANG PublicHealthClinical ty，Suzhou Center，Fudan 201508， 215123，China；’shanghai University，Shanghai China author：Z删NG Corresponding Huan-xiang。Email：hzhang@suda．edu．cn To of tat—rev-il$一 determinethe DNAvaccines 【Abstrac