三七总皂苷的纯化工艺探微.docVIP

精品论文 参考文献 三七总皂苷的纯化工艺探微 陈宇 (广西梧州制药lt;集团gt;股份有限公司 543002) 【摘要】三七总皂苷中含有很多单体皂苷，对凝血时间的延长、血管的扩张、心肌耗氧量的降低、自由基的清除、血小板凝集的抑制具有一定的药理作用。据我国有关文献的报道，可以运用大孔吸附树脂法对富集的三七总皂苷进行纯化，但是由于实际的操作过程中，缺乏较为全面系统的研究，使得三七总皂苷的纯化的工艺参数和条件尚不明确，大孔吸附树脂法仅能够去除提取液中的淀粉、糖类等，对三七总皂苷的色素去除效果并不理想，对具体的工艺参数和纯化条件还需要进一步的完善。 【关键词】纯化工艺 提取液 三七中皂苷 【中图分类号】R94 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）11-0391-02 在我国的广西、云南和四川等地盛产三七。作为三七的主要活性成分，三七总皂苷中含有很多单体皂苷，对凝血时间的延长、血管的扩张、心肌耗氧量的降低、自由基的清除、血小板凝集的抑制具有一定的药理作用。下文试验中将通过对三七材料的运用，以大孔吸附树脂法对三七提取液进行有效的分离和纯化，全面系统的考察纯化过程中的影响因素，以得到高纯度的三七总皂苷。 一、三七纯化工艺的实验原理及器材运用 （一）纯化工艺所需材料、试剂及仪器 （1）实验选取经某大学药学院鉴定后，确定总皂苷含量为8.07%的三七药材；中国药制品鉴定所鉴定的人参皂苷Re的对照品；分析纯冰醋酸、香草醛和高氯酸。 （2）某生物科技有限公司提供的型号为W201B的恒温水浴锅，和旋转蒸发器；河南太康科教器材厂提供的循环水式真空泵；军事医学实验仪器厂提供的冷冻干燥剂；UV-9100型紫外可见分光光度计；某材料化工玻璃厂提供的色谱柱；D-101型打孔吸附树脂； （二）对各种材料含量的测定及工艺条件的筛选 （1）制备标准曲线 对照品人参皂苷Re的精密称取量约为6.0mg，经甲醇定容后使其至10mL。对上述溶液进行适量的精密吸取，在常温的条件下使溶液挥干，将配置好的香兰素冰醋酸以0.2 mL5%的比例加入溶液中，同时要加入0.8 mL的高氯酸，在60deg;的水浴条件下进行15分钟，2分钟的流水冷却时间，最后精确加入5mL的冰醋酸，进行充分摇匀与550nm对吸光度进行检测。 （2）测定三七总皂苷的方法 称取质量约为20mg的三七中皂苷样品，经甲醇定容后使其至10mL。运用0.45um的膜进行过滤，除去初滤液，对续滤液精密收集，在标准曲线制备样的规定下，对吸收度认真测定，并对样品的含量进行计算。 （3）称取8目~40目的三七粉末，提取条件是：提取三次10倍量70%的乙醇回流，每次提取要进行1.5h然后将滤液合并，在减压的条件下使其浓缩到一定的体积，后对总皂苷的质量测定为23.49mg/ mL。 二、三七纯化工艺的实验步骤 （1）确定吸附容量 对三七样品液分别吸取30 mL上柱，水洗流出液至没有molish反应，以30%、50%、70%、90%的乙醇溶液120mL进行梯度洗脱，流速控制为1.5mL/min,分别收集4份30mL的洗脱液，对共有的16份进行编号后，对总皂苷含量进行测定，得出其吸附容量。实验结果分析如表1: 表1 （2）洗脱溶媒作用 对三七样品液分别吸取30 mL上柱，使用蒸馏水量分别为65mL、85 mL、105 mL,70%的乙醇120mL洗脱，分段收集洗脱结果，减压浓缩后进行冷冻干燥，对总皂苷含量进行测定，实验结果分析如表2: 表2 实验结果表明3中洗脱条件下，对解吸洗脱溶媒的确定为70%的乙醇用量90mL。 结语：大孔吸附树脂法对三七总皂苷的色素去除效果并不理想，具体的工艺参数和纯化条件还需要进一步的完善。 参考文献 [1]周家明,高明菊,赵爱,马妮,崔秀明,朱琳.鲜三七根茎中提取三七总皂苷的纯化及脱色工艺研究[J]. 科技创新导报. 2011(14) [2]郑军献,浦锦宝,胡轶娟,梁卫青,魏克民.大孔吸附树脂分离纯化白芍总皂苷的研究[J]. 医学研究杂志. 2010(11) [3]陈新艳,牛泱平.浙江七叶树种子中七叶皂苷的分离纯化[J]. 中药新药与临床药理. 2010(03) [4]孟琼,陈治宇.三七总皂苷提取分离及分析方法研究进展[J]. 承德医