不同剂量鸭IFNα真核表达质粒对鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭细胞和体液免疫调节作用初探 研究.pdfVIP

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会 高于200岭实验组(图2)，100峙组免疫鸭外周血中和抗体效价高于50和200峙实验组(图3)， 所以pcD-慵一DuⅡNm作为免疫佐剂的最佳剂量为100峙／只。 参考文献略 不同剂量鸭IFN．Q真核表达质粒对鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭 细胞和体液免疫调节作用初探 程志萍。，程安春々，汪铭书‘‘t陈斌。‘刘阉4，段坤1。周雪‘，陈孝跃。一 (1．四川农业走擘动物科技学院禽病防治研究中心，四川雅安，625000；2．动物疫病与人类健康四川省重 点实验室。四川雅安，62如00：3．四川省暮匡防疫总站，四川成都，6l0041) 摘要为探索鸭a干扰素(ⅡN吨)真板表逸质扭(pcDNA．sDIFN哪)对鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭的免疫调 节作用，本文将pcDNA—sDⅡ州吨以每只50，100和200嵋三十剂量用肌肉注射法分别免疫28日龄鸭， 2l、28．35，49．63，84，105．126．154、182d秉血用间接ELIsA法检诩恤L清抗体水平．蛄果表明： 不同荆量pcDNA_sDlnh免疫蛆鸭T淋巴细胞对CorIA的反应能力于3^49d均显著(P郢．05)或极显 d均极显著(P翊．01)或 著(P如．01)高于弱毒和空载体对照组；鸭外周血cD’十T淋巴细胞数量于7~28 里著(P璺Dt∞)高于弱毒和空斑体时熙组．第7d时，不同舟J量pcDN椭D1FN吨克疲组鸭血清抗体水平 和空戢体对照组，其余组问无显著羔异(P卸．05)．在诱导细胞免疫和体液免疫方面，弱毒和空栽体对照 蛆闻无显著差异‘P卸．05)．研究表明．口cDNA。SDlFN吨提前15d免疫能显著增强DP弱毒疫苗诱导的 鸭细胞免疫和体液免疫力，是—种良好的增强DP弱毒疲苗细胞免疫和体液免疫的分于佐卉j．用肌肉注射 口cDNA．SDiFN吨以每只20。ⅡE的效果最佳． 关键词鸭IFN吨真核表迭质粒；鸭痘弱毒疫苗：细胞免疫；体液免疫：分子佐剂 干扰素(Ime睡ron，IFN)是一系列具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等生物活性的蛋 白质。根据干扰素的氨基酸结构、抗原特性和分泌的细胞来源．可将干扰素分为三类：IFN．d， 有相同的细胞表面受体和相似的生物学活性，因而统称为I型干扰素。而IFN吖属于II型 干扰素型干扰素，主要由T细胞产生，与I型干扰素的生物学活性有明显不同。1957年Isaccs IFNm作为亚单位疫苗和重组疫苗佐剂的研究报道14．…，可DuIFN-n作为疫苗佐剂的应用 还未见报道，本文拟在本实验室前期工作的基础上17J。将获得的鸭口干扰素真核表达质粒 d后接种DP弱毒疫苗，用淋巴细 (DcDNA-SDIFNm)不同剂量肌肉注射28日龄鸭，15 作为免疫调节剂的调节效果，为pcDNA—SDⅡN吨作为活疫苗增强剂提供科学依据。 1材料与方法 1．1质粒及疫苗 实验室构建、制备。菌株DH5q由本实验室保存，用于pcDNA．sDIFN吨的扩增。免疫质 粒均用PBs稀释。鸭瘟弱毒疫苗由中牧实业股份有限公司提供。 ‘为通讯作者 783 禽娄传染病 1．2实验动物及分组处理 29日龄北京鸭，经ELISA检颡jDPv血清抗体阴性，由四川农业大学水禽场提供。实验 100 100 载体对照组)：空载体pcDNAIlg，只。每组用0．5％盐酸普鲁卡因注射液进行预处理，每 只O．2n1L，24 d后所有鸭注射DP弱毒疫苗(一个 h后在相同部位注射pcDNA．sDlFN吨，15 免疫剂量，只)。 1．3主要试剂 培养基RPMll640(G1BCO BRL公司)，刀豆蛋白A(CofLA)(sigrna公司)，M1Wsigma 公司)，淋巴细胞分层液(上海华精生物高科技有限公司)．FITC标记鼠抗人cD3+