不同年龄C57BL6J小鼠耳蜗毛细胞形态学变化的实验研讨.pdfVIP

第七届中南地区实验动物科技交流会论文汇编 实验动物 29(3)：332—336． (9)：18-19． [11]龙翔，邰秀林．不同冷冻保护剂在猪精液冷冻中的作用分析[J]．畜牧业，1999， IA．Effectsof timeand of [12]AlmlidT，Johnson glycerolconcentration，equilibrationtemperature additionon ofboar frozenin ofAnimal glycerol post—thawviabilityspermatozoastraws[J]．Journal Science，1988，66(11)：2899—2905． [13]张巧玉，常青，史常旭等．不同冷冻保护剂对人精子染色体及超微结构影响的研究[J]．重庆医学，2002， 31(7)：550—552． 不同年龄C57BL／6J小鼠耳蜗毛细胞形态学变化的实验研究 黄正团1，宣伟军2，周仲昭3 (1．广西中医学院实验动物中心，南宁530001；2．广西中医学院一附院南宁530023， 3．广西中医学院瑞康医院南宁530011) 【摘要】目的通过不同年龄C57BL小鼠耳蜗毛细胞形态学观察，探讨其毛细胞损失随年龄变化的趋势。方 法选择C57BL／6J，J,鼠24只，分别于2月龄、4月龄、7／]龄随机各抽出8只动物处死取耳蜗，苏木精一伊红染色，制 作耳蜗基底膜铺片，显微镜下观察耳蜗毛细胞形态变化。结果C57BL／6Jd、鼠随着月龄的递增出现耳蜗毛细胞 损伤加重的趋势。2月龄小鼠未见明显耳蜗毛细胞丢失，4月龄小鼠开始出现耳蜗外毛细胞损害，其损坏部位仅局 限在耳蜗底回的起始端，7fl龄小鼠耳蜗毛细胞损害比4月龄加重，这种随着年龄增长而发生的耳蜗损害遵循着从 底回逐渐向顶回发展的规律，同时外毛细胞的损害比同区域的内毛细胞严重。结论C57BL／6Jd、鼠耳蜗毛细胞变 化规律符合老年性聋特点，可以作为研究老年性聋的动物模型。 【关键词】老年性聋；小鼠；耳蜗；动物模型 老年性聋属常见的感音神经性聋之一，是听觉器官衰老退变的过程，病冈病机复杂，至今尚 未明了，防治相当困难。由于该病进展过程较长，临床研究极为不便，利用动物模型复制疾病加 以研究，可以克服这些不足u1。耳蜗毛细胞是听力感受器，其损害情况是反映老年性聋的重要指 标。本实验通过观察C57BL／6J近交系小鼠耳蜗毛细胞形态学的变化规律，借以探讨是否能够作为 研究人类老年性聋的动物模型。 1 材料与方法 1．1 实验动物 选择清洁级C57BL／6Jd,鼠24只用于本实验，实验动物来源于中国医学科学院实验动物研究 2003-0001。小鼠喂标准饲料和清洁饮水，分别在出生后两个月，4个月和7个月各处死8只动物， 以了解不同年龄C57d、鼠的耳蜗毛细胞损害规律。 1．2 耳蜗形态学 1．2．1 耳蜗标本制备小鼠断头后在体视显微镜下解剖暴露岩都并取出听泡。在蜗尖钻孔并摘 除镫骨同时打开园窗，从蜗尖小孔向耳蜗内灌入4℃2．5％戊二醛磷酸盐缓冲液，然后浸泡固定24 小时。继用10％EDTA浸泡脱钙直至耳蜗骨质脱净，需时大约5天。 208 第t诵t}，前地随窑驻动物{r挂垡淹台睦文札缩 1 22 常舰显融解}}{j取高耳蜗基雇腱，饿≯：以苏水精架邑，般蒸水溧洗、I％盐酸酒精分化、稀 氨水反蓝、取燕水潦洗、0}红强色、双甍水漂洗．截取底、中，丁负刚基底膜，置于玻H上的甘油 滴中，盖上盖玻』h凝腔树脂判周。 l 23 图像丹析 光学显撇铤下．理察和比较小鼠在2H龄．4月龄和7月龄耳蜗底回．中同 和厩划毛细胞的形态币同变化。 2 结果 综台上t蜗々}毛细胞彤志所见．可苛三种娄掣：JE常毛细胞形志完整，清晰可敬：衰变毛细胞 表现为形态小鞋．以至模铡堆辨：亵I’：毛细胞丧现为空趾消，、：毛细胞衰变和衰亡旱现出从耳蜗 底同饷端丌始垤渐阳顶叫方向握延。即越靠近耳蜗睫鄙．毛