复方甘草搽剂中甘草酸含量的高效液相色谱法分析.docVIP

精品论文 参考文献 复方甘草搽剂中甘草酸含量的高效液相色谱法分析 曾敏 　　(武汉市中医医院 湖北武汉 430014) 　　【摘要】目的 建立复方甘草搽剂中甘草酸含量测定方法，为今后的质量控制工作提供可靠的理论依据。方法 采取高效液相色谱法，色谱条件：CosmosilC18柱，流动相甲醇-0.2mol/l醋酸铵-冰醋酸（65:35:1），流速1ml/min，波长为241nm，柱温为30℃。结果 甘草酸质量浓度在10.38-1040.60ug/ml范围内与峰面积存在良好的线性关系，平均回收率为101.462%，RSD值为1.25%。结论 建立方法具有准确性、精密度、重现性、稳定性良好等优势，可作为复方甘草搽剂的质量控制方法。 　　【关键词】 复方甘草搽剂 质量标准 甘草酸 含量 高效液相色谱法 　　【中图分类号】R932 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）14-0394-01 　　复方甘草搽剂为外用中药医院制剂，主要功效为消炎止痒，用于皮肤干燥、瘙痒等症。研究证实，高浓度的干草流浸膏具有显著地抗真菌作用，为处方的有效成分之一。本次研究中出于对复方甘草搽剂进行质量控制的目的，建立了如下含量测定方法，详见下文。 　　1 仪器与试药 　　Dionex Ultimate 300型高效液相色谱仪，配备低压四元梯度泵，多波长紫外检测器，自动进样器，柱温箱；UP5200H超声清洗机，电子分析天平，甲醇为色谱纯，水为超纯水；复方甘草搽剂，院内制剂室生产，批号甘草酸对照品，中国食品药品检定研究院，批号：110731-201217。 　　2 方法与结果 　　2.1色谱条件[1] 　　色谱柱为：CosmosilC18柱，(250mmtimes;4.6mm，5um)，流动相为：甲醇-0.2mol/l醋酸铵-冰醋酸(65:35:1)，流速为1ml/min，检测波长为241nm，进样量为10ul，柱温为30℃。 理论板数以甘草酸峰计应不低于5500。 　　2.2溶液制备 　　2.2.1对照品溶液制备 　　精密称定甘草酸对照品57.0mg，放置在50ml容量瓶中经甲醇稀释至刻度，制成对照品储备液，精密吸取甘草酸对照品储备液2ml，移至10ml容量瓶中经甲醇稀释至刻度，得对照品溶液。 　　2.2.2供试品溶液制备 　　取复方甘草搽剂，摇匀后精密量取10ml，放置在50ml容量瓶中，经甲醇稀释至刻度后超声处理5min，放冷至室温，摇匀，过滤，取滤液即为供试品溶液。以处方量制备缺甘草阴性样品，如供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。 　　2.3方法学考察 　　2.3.1线性关系考察 　　分别取甘草酸对照品储备液0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0ml，放置在10ml的容量瓶中，经甲醇定容至刻度，分别制成甘草酸10.40、20.79、51.98、103.96、207.92、519.79、1039.60ug/ml的系列对照品溶液，以2.1项下色谱条件10ul进样，以峰面积为纵坐标(A)，以甘草酸质量浓度为横坐标(X)，绘制标准曲线，得线性方程A=0.1452X-0.0134,r=0.9998，结果表明，甘草酸质量浓度在10.38-1040.60ug/ml范围内与峰面积存在良好的线性关系。 　　2.3.2精密度试验 　　取同一对照品溶液10ul进样，2.1项下色谱条件检测，连续进样5次，计算峰面积RSD值为0.32%，证实仪器精密度良好。 　　2.3.3重现性试验 　　取同一批号的样品，以2.2.2项下方法配制供试品溶液5份，在2.1所示色谱条件下10ul进样检测，计算甘草酸峰面积RSD值为0.79%，证实该方法的重现性良好。 　　2.3.4稳定性试验 　　取同一批次供试品溶液室温下放置1、8、16、24、48、72h后如2.1色谱条件下10ul进样检测，计算甘草酸峰面积RSD值为0.37%，证实供试品溶液在72h内稳定。 　　2.3.5加样回??试验 　　精密量取已知含量样品，按照高中低浓度加入甘草酸对照品溶液，以2.2.2所示供试品溶液制备方法制备溶液，按2.1色谱条件进样检测，计算回收率，详见表1。 　　表1甘草酸加样回收试验结果统计（n=6） 　　 　　2.4 含量测定 　　取3个不同批次样品，依2.2.2方法制成供试品溶液，按照2.1色谱条件10ul进样检测，外标法计算甘草酸含量，结果得到3个批次样品中甘草酸含量分别为0.61、0.62、0.62mg/ml。 　　3 结论 　　上述所建立的高效液相色谱条件具有具有准确性、精密度、重现性、稳定性良好等优势，可作为复方甘草搽剂